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血清

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人:
白振萍
址:
江苏科研试剂园区E栋1109室
编:
224100
铺:
https://www.hbzhan.com/st557658/
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胎牛血清有着极为重要的作用

2020-10-27  阅读(1865)

   胎牛血清是高品质的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成份较少。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。也是参与细胞生长是细胞培养较为重要的环节之一,胎牛血清也分很多种类针对不同的培养实验选择对应的胎牛血清才能让实验更好的进行下去。
  胎牛血清有着极为重要的作用。
  1.提供维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
  2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
  3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
  4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
  5.起酸碱度缓冲液作用。
  6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
  保存应该注意以下几点
  (1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.
  (2)热灭活是指56℃, 30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.
  (3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.
  (4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.
  (5)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.
  (6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.


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