上海莼试生物技术有限公司

ELISA检测试剂盒实验需要的试剂介绍及操作步骤

时间:2017-7-20阅读:382
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免疫组化检测试剂盒中有三个必要的试剂:分别是免疫吸附剂、结合物和酶的底物等

 完整的ELISA检测试剂盒包含以下各组分:
1.已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)
2.酶标记的抗原或抗体(结合物);
3.酶的底物;
4.阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
5.结合物及标本的稀释液;
6.洗涤液
7.酶反应终止液。
 
   常规ELISA检测试剂盒操作步骤:
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)免疫组化检测试剂盒在450nm波长处测定各孔的OD值。
*    进口/国产    英文名称    Artemether    含量:    HPLC≥98%    规格:    20mg/支
姜黄素    进口/国产    英文名称    Curcumin    含量:    HPLC≥98%    规格:    20mg/支
去甲氧基姜黄素    进口/国产    英文名称    Demethoxycurcumin    含量:    HPLC≥96%    规格:    20mg/支
双去氧基姜黄素    进口/国产    英文名称    Bisdemethoxycurcumin    含量:    HPLC≥96%    规格:    20mg/支
莪术醇(姜黄醇)    进口/国产    英文名称    Curcumol    含量:    HPLC≥98%    规格:    20mg/支
免疫组化检测试剂盒

 

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