上海莼试生物技术有限公司

进口检测试剂盒对DNA合成常见问题及解答

时间:2017-7-25阅读:328
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Q: 进口检测试剂盒怎样对合成DNA制品进行定量?
A: DNA的量与260 nm处的吸光度值(OD值)成正比,因此使用紫外分光光度计定量是zui科学的。1个OD值的合成DNA的重量约为33 mg。
Q: 怎样理解测定的OD值?
A: 进行OD值测定时,分光光度计上显示的数值为每毫升溶液中的OD值。当测定200 ml溶液中的OD值为1.5时,溶液整体的OD量应该为多少?此时的OD值 
= 1.5 OD/ml × 0.2 ml = 0.3 OD。
Q: 合成oligo DNA应怎样保存?
A: 保存合成的Oligo应该注意以下几点: 
1. 干燥制品很稳定,常温下数个月无问题。但为保证*,放置于-20℃保存为好。
2. 溶解后的溶液DNA短期内(1-2周)使用可放置在4℃下保存,长期保存请放置于-20℃。溶解DNA时,请注意使用无菌、无核酸酶的水或TE Buffer。
3. 荧光标记引物请避光保存。
Q: 合成DNA溶液在室温下放置了数天,还可以使用吗?
A: 溶液中的Oligo DNA常温下数天(3-4天)应该没问题,但不要放置一个星期以上。其寿命受溶液中的菌体、核酸酶等的影响。
Q: 制品溶解后发现有少许沉淀,会影响实验结果吗?
A: 所有的制品纯化后都要进行脱盐,脱盐是使用C18柱进行的,偶而会有微量的树脂溢出而进入制品。树脂不影响任何反应结果,请稍许离心后取上清使用。 
Q: 测定了制品的OD值后发现A260/A280< 1.8,制品质量(纯度)合格吗?
A: Oligo DNA和一般提取的双链DNA不同,A260/A280的比值不能准确衡量Oligo 
DNA制品的质量,该比值依赖于序列中的各种碱基的组份,下表中列出了不同碱基组成的20mer的Oligo DNA的A260/A280比值。
因此,如果您测定了A260/A280的比值小于1.8时,是由于进口检测试剂盒上述原因引起的。
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