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上海莼试生物技术有限公司
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小鼠elisa试剂盒分光光度计定量测定操作
2018-7-5 阅读(335)
在运用小鼠elisa试剂盒方法测定抗体方面，通常所用的方法称为间接法，也是目前zui常用的方法，其原理：间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM)，再经孵育洗涤后，加底物显色,底物降解的量，即为欲测抗体的量，其结果可用目测或用分光光度计定量测定。
操作步骤：
1.将抗原按5 μg/ml稀释于碳酸盐缓冲液(pH 9.6)，100 μl /孔，4℃过夜。
2.次日PBS－T清洗4次(快1慢3，间隔5分钟)。
3.加2％BSA封闭室温1 h，200 μl /孔。
4.阳性对照从10ug/ml，做倍必稀释，待测血清从1：50做倍比稀释，预试验后确定稀释倍数及阳性对照的起始浓度及稀释数量（以可以做标准曲线为参数），室温1h。
5.PBS－T清洗4次(快1慢3，间隔5分钟)。
6.加入1：3000（不同公司有不同的稀释度） PBS－T稀释的HRP标记的山羊抗人IgG，100 μl /孔，室温1h。
7.PBS－T清洗4次(快1慢3，间隔5分钟)。
8.小鼠elisa试剂盒显色，100 μl /孔，颜色变深后中止显色，2M硫酸在BIO－RAD酶标仪上读数，可用ABTS，OPD，TMB等
UV法含量测定用 马来酸 对照品 171250-200401 50mg
HPLC法含量测定用 对照品 171252-200401 50mg
HPLC法含量测定 对照品 171253-200401 100mg
TLC法有关物质检查 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮(杂质B) 对照品 171254-200401 100mg
鉴别 盐酸 对照品 171256-200401 100mg
含量测定 银杏酸 对照品 20mg
Oleuropein 橄榄苦苷 橄榄苦甙 32619-42-4 HPLC≥98% 20mg/支
Lobetyolin 党参炔苷 党参炔甙 136085-37-5 HPLC≥98% 10mg/支
Carnosic acid 鼠尾草酸 639426 HPLC≥98% 20mg/支
小鼠elisa试剂盒
