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α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测定步骤

2021-8-26  阅读(581)

α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。

2、 样本测定

(1)在试剂五中加入 18mL 试剂四充分溶解,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)

水浴 10min;现配现用;

(2)在试剂六中加入 1mL 蒸馏水,充分溶解待用;现配现用;

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、10μL 试剂六和 180μL 试剂五,混

匀,立即记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 2min20s 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。

测定原理

α-KGDH 催化 α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶 A 生成琥珀酰辅酶 A、二氧化碳和 NADH,NADH

在 340 nm 有特征吸收峰,以 NADH 的生成速率表示 α-KGDH 活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、

研钵、冰和蒸馏水。

磷酸化动力相关蛋白1抗体

DNA连接酶4抗体

二肽基肽酶6抗体

二氢还原酶抗体

有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体

有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体

DOM3Z蛋白抗体

蓬乱蛋白2抗体

磷酸化蓬乱蛋白2抗体

转录下调蛋白1抗体

脱氢酶/还原酶家族成员2抗体

牙本质磷蛋白抗体

Dermokine β蛋白抗体

DPCR1蛋白抗体

表皮乳头源性蛋白6抗体

双特异性蛋白磷酸酶7抗体

双特异性蛋白磷酸酶26抗体

阿米洛利结合蛋白1抗体

S期激酶活化蛋白DBF4A抗体

着丝粒相关蛋白DSN1抗体

双皮层蛋白结构域蛋白DCDC2抗体

神经干细胞树突调节蛋白DAGLα抗体

对接蛋白4抗体

DULLARD蛋白抗体

/蛋白激酶MNB抗体

无胸腺症相关蛋白DGCR6/迪格奥尔格综合征关键基因6抗体

朊蛋白DPL抗体

肌强直性营养不良蛋白激酶抗体

有丝分裂控制蛋白dis3抗体




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