兔肿瘤坏死因子α酶联免疫试剂盒【工作原理】
Tumor necrosis factor α,TNFα,肿瘤坏死因子α。TNFα前体是以跨膜蛋白的形式存在于细胞内,在细胞外被剪切成17KDa的成熟形态(157个氨基酸)。活性的TNFα以非共价键二聚体、三聚体甚至五聚体的形式存在,但在SDS-PAGE显示为单一17KDa条带。很多细胞都能合成TNFα,包括各种免疫细胞(单核细胞、巨噬细胞、T、B细胞、粒细胞、NK细胞)和非免疫细胞(上皮细胞、纤维细胞、肌细胞、Kuppfer细胞等)。TNFα的合成受到很多因素的影响。其生理功能zui早认为是有抗肿瘤活性,现在已明确不仅能调节肿瘤细胞的生长,对很多细胞的生长、分化和代谢都有影响。TNFα是免疫宿主反应的快速反应因子。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的兔TNFa抗体为多克隆兔TNFa抗体。检测相兔TNFa抗体也为多克隆兔TNFa抗体,经*(biotin)标记。样品和*标记兔TNFa抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
兔肿瘤坏死因子α酶联免疫试剂盒【每套试剂盒中内容】(96T)
材料 数量
兔TNFa标准品 96T(2vial)
预包被兔TNFa抗体的96孔板 96T(8×12)
*标记兔TNFa抗体 96T (1:100)
ABC(亲和素-过氧化物酶复合物) 96T (1:100)
样品稀释液 96T×2
兔TNFa抗体稀释液 96T×1
ABC稀释液 96T×1
TMB显色液A 96T×1
TMB显色液B 96T×1
TMB终止液 96T×1
ELISA洗涤液 96T×1(1:25)
兔肿瘤坏死因子α酶联免疫试剂盒【需要而未提供的试剂和器材】
1. 37℃恒温箱。
2. 标准规格酶标仪。
3. 自动洗板机。
4. 单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。
5. 蒸馏水,容量瓶等
6. 干净的试管和Eppendof管。