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上海博湖生物科技有限公司
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酶标板与蛋白和其它分子结合不同分类
2023-2-27 阅读(499)
根据酶标板与蛋白和其它分子结合才干的不同,又分为高结合力、中结合力和氨基化等。
1、高结合力
此种酶标板,表面经处理后,其蛋白结合才干大大增强,可达300~400ng IgG/cm2,首要结合的蛋白分子量>10kD。运用该类酶标板可进步敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易发生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需运用蛋白作为封闭剂。
2、中结合力
此类酶标板经表面疏水键与蛋白结合,适宜作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合才干为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可下降潜在的非特异性穿插反应。该类板可以慵懒蛋白或非离子去污剂作为封闭液。
ELISA试剂盒实验
3、氨基化
ELISA试剂盒这种酶标板经表面改性处理后具有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键代替。该类酶标板适宜作为小分子蛋白的固相载体。运用适宜的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的才干,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺陷为由于下降了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效地封闭。由于亲水和共价的表面特性,运用的封闭液有必要可以与非反应性氨基基团和所挑选的交联剂中任何功用基团发生作用。