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上海博湖生物科技有限公司
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血清实际从外观和性能上筛选介绍
2023-3-6 阅读(476)
在实际筛选时,主要从血清外观和实验操作时细胞的生长状态进行。
从外观上:
1. 颜色:
根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度。胎牛血清或多或少总有点溶血,因为胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂;
2. 澄清度:
高质量的胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡;
3. 血清沉淀:
血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有影响,沉淀的产生原因跟加工生产方式、是否反复冻融密切相关,在实验操作中可能会对细胞观察产生影响。
从性能上:
1. 细胞形态,在进行血清筛选时首先观察细胞的生长形态是否产生明显变化,以及观察贴壁细胞的贴壁情况,细胞在不同血清培养中可能会出现形态上的差异;
2. 倍增时间,一般情况下会选择倍增时间短的血清,值得注意的是血清的影响会传至5代,在进行测试时,最好培养五代后进行计倍增时间的计算;
3. 克隆形成率,测试时一般选50、100、200个细胞进行平板克隆测试,平均5d左右换一次液,两周后染色计数,对比克隆形成情况。
血清的质量,种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长,而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同,尤其是对克隆细胞的生长,某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此,在购买大量血清之前,必须对血清支持细胞生长能力进行检测,然后再大量购买质量好的同一批号的血清。