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上海博湖生物科技有限公司
主营产品： 高密度脂蛋白ELISA检测试剂盒,同型半胱氨酸ELISA检测试剂盒,游离脂肪酸ELISA检测试剂盒 |
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公司信息
- 联系人：
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- 200000
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- www.shbhbio-e.com
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更新时间：2023-10-26 16:32:46浏览次数：299
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Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*10以下是的订购信息储存条件：-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA（转化效率较高，*次使用前做预实验确定所加质粒的量），用手管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*103. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。
4. 6000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*102. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量。
4. 浓度不应高于25 μg/ml，过高的浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan，若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失，但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
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小鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒 :英文名称; Interleukin 27,IL-27 ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量，灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可，您可放心，且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒厂家 小鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒报价
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小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 :英文名称; CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量，灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可，您可放心，且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒厂家 小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒报价
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小鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒 :英文名称; complement factor H,CFH ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量，灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可，您可放心，且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒厂家 小鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒报价
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