按杂质谱控制的理念, 在药品质量标准中, 要求所采用的分析方法不仅能分离出样品中实际存在的杂质, 且能分离出各类潜在的杂质, 并对分离出的主要杂质能进行定性, 以便根据其来源和生理活性制定不同的质控限度. 纵观各国药典的发展, 利用反相HPLC 系统分析有关物质已成为药品质量控制的主流.河源市药物结构确认及杂质分析-CMA资质
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NMR（核磁共振）测试
仪 器：德国 Bruker DRX- 400 ，400MHz超导脉冲付里叶变换核磁共振谱仪；
测试条件：溶 剂： CDCl3
参 考 物： TMS
温 度： 20ºC
频 率： 1H谱：400.130MHz；13C谱：100.613MHz
测试结果：樟脑样品（批号为：Yz1408019）经核磁共振氢（1H）谱、碳（13C）谱、DEPT（DEPT135和DEPT90）谱、1H-1H COSY谱、13C-1H COSY谱、HMBC谱分析，确认该样品与樟脑（即1,7,7-*基二环[2,2,1]庚烷-2-酮）的化学结构（见结构图）相符。
5. MRM 技术在定量蛋白质组学研究中的应用复杂组分共流出物的干扰和宽达9 个数量级以上的动态范围，一直是影响血清或血浆等生物体液中蛋白质、多肽准确定量的关键因素。尽管研究者们也尝试采用多种方法，包括尽可能充分的色谱分离，去除高丰度蛋白质等，但质谱对低丰度蛋白质
的检测灵敏度和精密度仍不能满足分析的要求。M R M 技术在定量蛋白质组学应用上展现了其方法
的优点。首先，在一定程度上提高了测定的动态范围，其原因一方面是因为对离子的选择检出，降低了复杂组分的背景信号，增强了一些低丰度蛋白质的检测灵敏度；另一方面通过对高丰度、低丰度蛋白质M R M 离子对的选择来均衡两者的响应信号差异。例如，对高丰度蛋白质，选择响应丰度较低的母离子- 子离子对；对低丰度蛋白质，选择响应程度较高的母离子- 子离子对，从而均衡高、低丰度的信号差异。其次，减少了复杂组分共流出物的干扰，增强了检测的特异性。此外，MRM 技术高通量的特点，也为多种蛋白质的同时定量提供了条件。M R M 技术通过与同位素稀释法或m T R A Q 技术结合，对已知量加入的内标肽段和样本中的真实肽段分别进行标记，选择不同母- 子离子对获得不同的色谱检出信号，比较两者信号，从而产生定量结果[12,13]。
Anderson 等[14]用MRM 技术定量分析了人体血浆中53 种高、中丰度蛋白质。其中47 个数据同批变异系数为2%～22%，显示了定量的良好精密度。分析结果的动态范围达到4.5 个数量级。Lin 等[15]用M R M 定量测定了人体血浆中中等丰度蛋白质的实际浓度。测定结果表明其浓度范围达到了3～700 nmol/L。12 次反复测量变异系数(CV)值小于25%。对于血浆中的低丰度蛋白质，Keshishian 等[16]也采用MRM 和同位素稀释的方法进行了定量分析。在未进行蛋白质或多肽亲和富集的条件下，去除血浆6 种高丰度蛋白质后，低丰度蛋白质的检测限在1～10 mg/L，CV值在3%～15%，与质谱直接检测血浆蛋白的方法相比，分析性能改善了1000 倍。实验结果显示了这种MRM 技术进行定量的高精密度，以及用于分析复杂样本的高动态范围。
6. MRM 技术在蛋白质与RNA 相互作用研究中的应用蛋白质- R N A 复合物在调控真核细胞的基因表达上具有重要意义。基于M S 的方法研究蛋白质与R N A 的相互作用多有报道，而采用M R M 与其他技术相结合的方法，能更深入地研究蛋白质与RNA 作用的结构域，得到更丰富的相互作用结构信息。其原理是：通过母离子扫描的模式，获得含有磷酸碎片的所有多肽离子的准确分子量和电荷数。设计MRM 离子对，母离子扫描获得的信号离子作为母离子，子离子设定为碱基序列AUGC ，在MRM 的检测域值达到设定值后，进行高分辨增强子离子扫描, 终获取蛋白质序列信息和与其作用的R N A 序列信息。Lenz 等[17]采用此方法，研究了U1SnRNP 和1515K-61K-U4atacSnRN 与RNA 的相互作用信息，分别用*和R N A 酶T 1、A 对蛋白质和R N A 进行酶切，得到相互作用的短肽段和RNA 的短序列，在负离子模式进行母离子扫描，依据获得的结果设计MRM 母- 子离子对，在正离子模式进行MRM-子离子增强扫描，后得到了相互作用结构域等更为详细的信息。
7. 展望M R M 技术是基于蛋白质或多肽的已知信息或假定信息进行质谱信号采集，有针对性地获取数据的方式。通过与其他质谱扫描技术的联合使用，能在蛋白质组研究中充分展现其高灵敏度、高准确性、高重复性、高通量的应用优点。可以预见，通过对M R M 技术的进一步优化，例如优化M R M 母－子离子的选择条件，从已有的蛋白质谱中人工获取或利用软件计算母- 子离子；优化每次运行MRM 离子对的数目，改善色谱峰形，或者通过设立不同时间段检测离子对，增加分析通量；联合其他多种质谱扫描技术，将使M R M 技术拥有更好的应用前景，更有效地满足蛋白质组学的分析需求。
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