guansuan是20种蛋白氨基酸之一。guansuan的羧酸根阴离子和盐被称为guansuan。guansuan是重要的神经递质,在长期增强中起关键作用,对学习和记忆很重要。guansuan是GABA的前体,但功能却相反。它可能在心脏和前列腺的正常功能中起作用。guansuan是穿越血脑屏障的少数营养素之一,用于治疗抑郁症,ADD和ADHD,疲劳,酒精中毒,癫痫,肌肉营养不良,智力低下和精神分裂症等疾病。Amplite™荧光guansuan含量测定试剂盒提供了快速灵敏的方法来测定各种生物样品中的guansuan。在化验中 偶联的酶系统催化L-guansuan与NADP之间的反应生成NADPH,NADPH传感器可以特异性识别该NADPH,并将其循环回NADP。在反应过程中产生红色的荧光产物。信号可以通过荧光酶标仪或吸光度酶标仪读取。使用我们的Amplite™荧光guansuan试剂盒,在100 µL反应体积中,我们检测到的guansuan含量仅为10 µM。该测定法是鲁棒的,并且可以容易地适用于需要测量guansuan的多种应用。信号可以通过荧光酶标仪或吸光度酶标仪读取。使用我们的Amplite™荧光guansuan试剂盒,在100 µL反应体积中,我们检测到的guansuan含量仅为10 µM。该测定法是鲁棒的,并且可以容易地适用于需要测量guansuan的多种应用。信号可以通过荧光酶标仪或吸光度酶标仪读取。使用我们的Amplite™荧光guansuan试剂盒,在100 µL反应体积中,我们检测到的guansuan含量仅为10 µM。该测定法是鲁棒的,并且可以容易地适用于需要测量guansuan的多种应用。
荧光酶标仪 | |
激发 | 540纳米 |
发射 | 590纳米 |
隔断 | 570纳米 |
推荐板 | 纯黑色 |
组分A:酶混合物 | 1瓶(冻干粉) |
组分B:测定缓冲液 | 1瓶(10毫升) |
成分C:NADP | 1个小瓶 |
组分D:guansuan | 1个小瓶 |
组分E:稀释缓冲液 | 1瓶(10毫升) |
协议摘要
准备guansuan标准品和/或测试样品(50 µL)
加入guansuan工作溶液(50 µL)
在室温下孵育30分钟-2小时
监测Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)的荧光强度
重要说明
开始实验之前,请在室温下解冻所有试剂盒组件。
储备溶液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1. NADP储备溶液(200X):
将100 µL稀释缓冲液(组分E)添加到NADP(组分C)小瓶中,制成200X NADP储备溶液。
2.guansuan标准溶液(100 mM):
将200 µL稀释缓冲液(组分E)添加到小瓶guansuan(组分D)中,制成100mMguansuan标准溶液。
为了方便起见,请使用我们的系列稀释计
取100 mMguansuan标准溶液,并在稀释缓冲液(组分E)中以1:100的比例配制1000 µMguansuan标准溶液(SD7)。取1000 µMguansuan标准溶液(SD7)并进行1:3连续稀释,以使用稀释缓冲液(组分E)获得系列稀释的guansuan标准溶液(SD6-SD1)。
准备工作溶液
1.将10 mL的测定缓冲液(组分B)添加到酶混合瓶(组分A)中。
2.将50 µL 200X NADP储备溶液添加到Enzyme Mix瓶中,并充分混合以制成guansuan工作溶液。 注:guansuan工作液是够两个96孔板。它在室温下不稳定,应在2小时内及时使用,并避免暴露在光线下。 注意: 可替换地,可以通过加入200μL的使酶混合物原液50X ħ 2 ö入瓶酶混合物(组分A),然后由储备溶液混合制备guansuan工作溶液 用测定缓冲液(组分B)和200X NADP储备溶液成比例。
程序
表1.黑色96孔微孔板中guansuan标准品和测试样品的布局。SD =guansuan标准液,BL =空白对照,TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
SD1 | SD1 | ... | ... |
SD2 | SD2 | ... | ... |
SD3 | SD3 | ||
SD4 | SD4 | ||
SD5 | SD5 | ||
SD6 | SD6 | ||
SD7 | SD7 |
表2. 每个孔的试剂组成
好 | 体积 | 试剂 |
SD1-SD7 | 50微升 | 连续稀释(1至1000 µM) |
BL | 50微升 | 稀释缓冲液(组分E) |
TS | 50微升 | 样品 |
根据表1和2中提供的布局,准备guansuan标准液(SD),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
将50 µLguansuan工作溶液添加到guansuan标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,使guansuan的总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板,将25 µLguansuan工作溶液添加到每个孔内,总体积为50 µL /孔。
在避光的条件下,将反应在室温下孵育30分钟至2小时。
使用荧光板读数器在激发= 530-570 nm,发射= 590-600 nm(Ex / Em = 540/590 nm),截止= 570 nm时监控荧光的增加。 注意: 该板的内容物也可以转移到白色透明底板上,并由吸光度微板读取器以〜570 nm〜〜605 nm(A575nm / A605nm)的吸光度比进行读取。与荧光读数相比,吸收检测的灵敏度较低。
Amplite™荧光法guansuan检测试剂盒 *红色荧光* Amplite™ Fluorimetric Glutamic Acid Assay Kit *Red Fluorescence* 200 Tests Amplite™荧光法guguanggantai检测试剂盒 *红色荧光* Amplite™ Fluorimetric Glutathione Assay Kit *Green Fluorescence* 200 Tests Amplite™荧光法guguanggantaiGSH/GSSG比率检测试剂盒 *绿色荧光* Amplite™ Fluorimetric Glutathione GSH/GSSG Ratio Assay Kit *Green Fluorescence* 200 Tests Amplite™荧光法甲醛定量试剂盒 *绿色荧光* Amplite™ Fluorimetric Formaldehyde Quantitation Kit *Green Fluorescence* 200 Tests Amplite™比色法尿素定量试剂盒 *蓝色* Amplite™ Colorimetric Urea Quantitation Kit *Blue Color* 200 Tests