聚zuansuan是掺入重组蛋白中zui流行的亲和标签之一。它可以插入N端或C端,并在多种宿主中表达。由于其体积小,聚zuansuan标签可作为蛋白质纯化和检测的理想工具。HIS Lite™Cy3 Bis NTA-Ni和Cy5 Bis NTA-Ni复合物可对His标记的融合蛋白进行特异性和高度灵敏的检测。Ni-NTA配合物zui早由Kapanidis等报道。对具有zui小交叉反应性的多zuansuan标签具有特异性。Cy3和Cy5染料在通常可用的波长处显示强荧光信号,几乎没有猝灭。Cy3 Bis NTA-Ni和Cy5 Bis NTA-Ni复合物可直接应用于SDS-PAGE凝胶或Western blot膜进行荧光成像。使用Cy3 Bis NTA-Ni和Cy5 Bis NTA-Ni复合物进行检测所需的孵育时间少于蛋白质-抗体结合所需的孵育时间。由于Ni-NTA络合物直接与荧光团偶联,因此不需要二次反应。
普通储备溶液的制备
表1.将HIS Lite™Cy3 Bis NTA-Ni复合物的特定质量重构至给定浓度所需的水量。请注意,该体积仅用于制备储备溶液。有关适当的实验/生理缓冲液,请参阅样本实验方案。
12610 | HIS Lite™ Cy3 Bis NTA-Ni Complex | HIS Lite™ Cy3 Bis NTA-Ni Complex | 1 mg |
13000 | 荧光底物Benzoyl-Leu-Gly-Arg-Aminoluciferin | Benzoyl-Leu-Gly-Arg-Aminoluciferin | 1 mg |
13001 | 荧光底物BOC-Leu-Gly-Arg-Aminoluciferin | BOC-Leu-Gly-Arg-Aminoluciferin | 1 mg |