吞噬作用定义为细胞对质膜包膜内颗粒的细胞摄取。通过吞噬和破坏入侵的微生物，吞噬作用的过程对于先天免疫应答至关重要。吞噬作用还需要通过清除凋亡小体来维持组织稳态和重塑。吞噬作用的摄取机制取决于颗粒的大小，受体-配体相互作用以及细胞骨架的参与。一旦内在化，吞噬体就会与溶酶体融合，形成用于消化的次级吞噬体，导致pH值逐渐降低。我们的Cell Meter™荧光吞噬分析试剂盒利用*的pH依赖性Protonex™600红胶乳珠结合物。珠粒已准备好使用悬浮液。与大多数现有的荧光染料不同，Protonex™600红胶乳珠偶联物在细胞外无荧光。但是，由于它们位于酸性吞噬体/吞噬溶酶体内部，其荧光急剧增加。该特性使其易于使用，而无需进行台盼蓝淬灭步骤，并且是研究吞噬作用及其调控的强大工具。Cell Meter™荧光吞噬分析试剂盒还包括绿色荧光细胞活力染料，该染料可同时检测活细胞和通过荧光显微镜检查吞噬过程。该测定法也可以适用于荧光微板读取器和流式细胞仪检测。该特性使其易于使用，而无需进行台盼蓝淬灭步骤，并且是研究吞噬作用及其调控的强大工具。Cell Meter™荧光吞噬分析试剂盒还包括绿色荧光细胞活力染料，该染料可同时检测活细胞和通过荧光显微镜检查吞噬过程。该测定法也可以适用于荧光微板读取器和流式细胞仪检测。该特性使其易于使用，而无需进行台盼蓝淬灭步骤，并且是研究吞噬作用及其调控的强大工具。Cell Meter™荧光吞噬分析试剂盒还包括绿色荧光细胞活力染料，该染料可同时检测活细胞和通过荧光显微镜检查吞噬过程。该测定法也可以适用于荧光微板读取器和流式细胞仪检测。

1. 平板细胞
2. 添加12.5 µL Protonex™600红乳胶珠缀合物
3. 在37°C孵育4小时
4. 添加12.5 µL CytoTrace™绿色
5. 在37°C孵育30分钟
6. 使用得克萨斯红和FITC滤光片通过显微镜监测荧光

重要说明
在开始实验之前，将所有套件组件解冻至室温。

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

1. Protonex™600 Red-Latex珠缀合物溶液（12X）：
在2 mL细胞生长培养基（含10％FBS）中添加8 µL Protonex™600 Red-Latex珠缀合物（组分A）。注意：未使用的磁珠可以在4°C下存储。

2. CytoTrace™Green储备溶液（400X）：
将20 µL DMSO（组分C）添加到CytoTrace™Green（组分B）小瓶中，并充分混合。注意：未使用的CytoTrace™Green DMSO储备溶液可以等分到一次性小瓶中，并保存在-20°C下。

准备工作溶液

CytoTrace™Green工作溶液（12X）：
在2 mL细胞生长培养基中加入5 µL CytoTrace™Green储备溶液（400X）并充分混合。