碱性磷酸酶是一种高度敏感的酶,适用于ELISA,免疫组织化学,Northern,Southern和Western印迹应用。它被广泛用于各种生物学测定(尤其是免疫测定)和基于ELISA的诊断中。该Amplite™碱性磷酸酶测定试剂盒使用专有的发光磷酸酶底物,定量溶液和细胞提取物中的碱性磷酸酶活性。这种专有的磷酸酶底物产生一种发光产物,该产物在与磷酸酶相互作用时产生强发光。
发光酶标仪 | |
推荐板 | 纯白色 |
组分A:磷酸酶底物 | 1小瓶(冻干粉) |
组分B:反应缓冲液 | 1瓶(5毫升) |
组分C:碱性磷酸酶标准品 | 1小瓶(冻干粉,10单位) |
组分D:测定缓冲液 | 1瓶(5毫升) |
- 准备碱性磷酸酶工作溶液(50 µL)
- 添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品(50 µL)
- 在室温下孵育30-60分钟
- 添加测定缓冲液(组分D)(50 µL)
- 在室温下孵育10至30分钟
- 监控发光强度
重要说明
开始实验之前,请在室温下解冻所有试剂盒组件。
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1.碱性磷酸酶标准溶液(100U /毫升):
添加100μL蒸馏水的2含0.1%BSA(H 2 -O - 0.1%BSA)到碱性磷酸酶标准的小瓶(成分C,10个单位),以产生100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。注意:碱性磷酸酶标准溶液不稳定。
配制标准溶液
为了方便起见,请使用我们的系列稀释计
将10 µL的100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液添加到990 µL的H 2 O-0.1%BSA中,以生成1,000 mU / mL的碱性磷酸酶标准溶液。取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液,并在H 2 O-0.1%BSA中执行1:100,以获得10 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液(AS7)。然后取10 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液(AS7),并在H 2 O-0.1%BSA中进行1:3系列稀释,以得到系列稀释的碱性磷酸酶标准液(AS6-AS1)。注意: 碱性磷酸酶标准品未使用的系列稀释液应丢弃。
12500 | 荧光素酶 *重组荧光素* | Luciferase *Recombinant firefly* | 1 mL |
12512 | D-荧光素磷酸盐 | D-Luciferin phosphate *CAS 145613-12-3* | 1 mg |
12513 | D-荧光素半乳糖苷 | D-Luciferin galactoside *CAS 131474-38-9* | 5 mg |