中国科学院 | 分子量 | 激发(nm) | 发射(nm) | 消光系数(cm -1 M -1) | 量子产率 |
219138-02-0 | 821.75 | 376 | 482 | 17000 1 | 0.53 1 |
Z-IETD-AFC是包含乙酰基(Ac)部分的荧光半胱天冬酶8 /粒酶B底物。该底物被胱天蛋白酶8水解以产生高荧光的7-酰胺基-4-三氟甲基香dou素(AFC)。
重要的是要存放在<-15°C的环境中,并应存放在阴凉处。
自收到之日起12个月内可以使用。
程序
以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。
使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定
- 在DMSO中准备10 mM的储备溶液。
- 如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。
- 将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。
- 使用荧光酶标仪读取荧光,或使用酶标仪读取吸光度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定
- 在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。
- 根据需要处理细胞。
- 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。
- 将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO 2的 培养箱中孵育细胞至少1小时。
- 用HHBS清洗细胞至少一次。
- 通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定 (仅适用于#13470-13476)
- 通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。
- 根据需要处理细胞。
- 以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。
- 用HHBS清洗细胞至少一次。
- 通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
13426 Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝 Ac-LEHD-AMC 5 mg 13427 Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿 (Ac-LEHD)2-R110 1 mg