ELISA试剂盒操作步骤

ELISA试剂盒操作过程：

1. 加规范品：在酶标包被板上设规范品孔，依次参加不同浓度的规范品50ul(主张每个浓度做2个平行孔)

2. 加样：别离设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其他各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，
然后再加样品亲和素10μl。加样ELISA试剂盒将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，悄悄晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗刷液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗刷：当心揭掉ELISA试剂盒封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗刷液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：除空白孔外每孔参加酶标试剂50μl。

7. 温育：操作同3。

8. 洗刷：操作同5。

9. 显色：每孔先参加显色剂A50μl，再参加显色剂B50μl，悄悄震动混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 停止：每孔加停止液50μl，停止反响(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加停止液后15分钟以内进行。

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