ELISA试剂盒实验原理与注意事项

ELISA试剂盒实验原理：

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠总蛋白（TP）水平。用纯化的小鼠总蛋白（TP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入总蛋白（TP），再与HRP标记的总蛋白（TP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体ELISA试剂盒复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的总蛋白（TP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠总蛋白（TP）浓度。

ELISA试剂盒注意事项：

1．ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做ELISA试剂盒标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔di一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和ELISA试剂盒各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。