标准品原理与操作流程

标准品原理：

 本试剂盒系由预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪瘟病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪瘟病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪瘟病毒抗体。

标准品保存方法：

一、防蜕变： 

1．防氧化：亚硫酸钠、、均易被氧化，瓶口应涂腊。 

2．防碳酸化：硅酸钠、过氧化钠、苛性碱均易吸收二氧化碳，应该涂腊。 

3．防风化：晶体碳酸钠、晶体硫酸铜应进行腊封，存放在地下室中。 

4．防分解：碳酸氢铵、浓硝酸受热易分解，涂腊后，存放在地下室中。 

5．活性炭能吸附多种气体而蜕变，（木炭亦同），应放在干燥器中。 

6．黄磷遇空气易自燃，永远保存水中，每15天查水一次：磷试剂瓶中加水、置于有水水糟中，上加钟罩关闭。 

7．钾、钠保存在火油中。 

8．溶液中滴几滴稀硫酸，加入过量细铁粉，进行腊封。 

9．葡萄糖溶液容易霉变，稍加几滴甲醛即可保存。 

10．甲醛易聚合，应开瓶后立即加少数甲醇；乙醛则加乙醇。 

二、防光： 

1．，浓硝酸及大部份有机药品应该放在棕色瓶中。 

2．硝酸盐存放在地下室中既防热，又防光、防火还能防震。 

3．有机试剂橱窗一概用黑漆涂染。 

4．实验室用色布窗布，内红外黑双层。 

标准品操作流程：

1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。

2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。

3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。

4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。

5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。

6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。

7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。

8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。

9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。