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原代细胞如何分离和培养？2025/2/5
用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，...
ELISA试验手工洗涤介绍2025/1/20
洗涤在ELISA试验过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA试验就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反...
ELISA检测过程阴性对照（品）简述2025/1/13
阴性对照（品）：1、阴性对照（品）的概念与要求：所谓阴性对照（品），应当是本项检测试验中采用与待捡物（样品、人用试剂就是人的血清等）具有同源性和同质性，又不含有待检物质，并能客观比较和鉴别处理因素（血...
聚合酶链反应（PCR）引物的作用归纳2025/1/6
PCR(聚合酶链反应)是一种常用的分子生物学技术，可用于扩增DNA序列。在PCR反应中，引物是起关键作用的短链DNA分子，它们会与待扩增DNA序列的两端匹配，指示聚合酶在这些位置开始复制DNA。引物在...
影响ELISA试剂盒质量因素小结2024/12/23
ELISA试剂盒变质是ELISA实验中比较常见的问题，下面小结影响ELISA试剂盒质量事项。1、试剂因素不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量全一致，即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差...
ELISA双抗夹心法具体操作步骤2024/12/17
ELISA双抗夹心法首先也是用特异性抗体包被于固相载体，经洗涤后加入含有抗原之待测样品，如待检样品中有相应抗原存在，即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合，经保温孵育洗涤后，即可加入酶标记特异性抗体，...
细胞培养无菌操作关键点2024/12/9
细胞培养最看重的就是无菌操作，无菌操作是细胞培养是否成功的关键点。1、使用前用75%的乙醇擦拭细胞间的桌面、超净台、孵箱和离心机等；紫外照射细胞间和超净台30分钟以上才可以进入使用。2、进入细胞间必须...
PCR检测试剂盒反应设计引物详解2024/12/2
PCR检测试剂盒反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任...
静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养操作步骤2024/11/25
原代细胞培养是将机体内的某组织取出，分散成单细胞，在人工条件下培养使其生存并不断生长、繁殖的方法。借助这种方法可以观察细胞的分裂繁殖、细胞的接触抑制、以及细胞的衰老，死亡等生命现象。静置贴壁细胞(包括...
ELISA检测类型的共同阶段2024/11/18
ELISA检测是一种免疫检测方法，通常用于测量生物样品中的抗体或抗原，包括蛋白质或糖蛋白。像其他免疫检测法一样，它们依靠抗体与目标的结合来促进检测。通常情况下，ELISA检测是在96孔板中进行的，这种...
细胞培养中污染源有哪些？2024/11/4
细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出，然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离，也可以来源于已建立的细胞系或细胞株。细胞常规培养是在细胞房中进行，...
无血清培养基的优缺点2024/10/28
无血清培养基是不添加动物来源血清或其他生物提取液，但仍可以维持细胞在体外较长时间生长、繁殖的培养基。无血清培养基的优点：1.可避免血清批次间的质量变动，提高细胞培养和实验结果的重复性。2.避免血清对细...
细胞活跃快乐方法了解下2024/10/21
细胞是生物体的结构和功能的基本单位生物学名词。一般具有细胞核、细胞质和细胞膜。植物细胞的细胞膜外还有细胞壁。体形极微，在显微镜下始能窥见。形状多种多样，主要由细胞核与细胞质构成，表面有薄膜。动植物细胞...
ELISA洗涤手工洗板方式具体方法2024/10/14
ELISA洗涤手工洗板人为因素比较大，实验人员必须经验丰富，洗涤次数要足够，冲击力又不要太大，加入的洗液量以刚满反应孔为限，防止孔口内有游离酶未能洗净，同时防止孔与孔之间液体交叉。洗涤结束后扣干亦非常...
ELISA实验包被条件如何选择?2024/10/14
酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay，简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法...
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