当前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 50T衣原体通用PCR检测试剂盒
本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | Chlamydia spp.PCR |
货号 | XG-P1232 |
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分:
编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
试剂九 | 使用手册 | 400 uL(红盖) |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线
紫红胆盐葡萄糖琼脂250g用于药品及生物制品中耐胆盐革兰氏阴性菌分离培养
Vogel–Johnson 琼脂基础 250(g) incubation media Vogel–Johnson 琼脂基础 250(g)
木糖-明胶培养基发酵管 木糖-明胶培养基发酵管 20支 BR
三糖铁琼脂(TSI)250用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(葡萄糖,乳糖,蔗糖)incubationmedia三糖铁琼脂(TSI)250用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(葡萄糖,乳糖,蔗糖)
含100mlBolton肉汤均质袋 10个/包 用于空肠弯曲菌选择性增菌培养。亚蓝metxylene blueInd25g
LM0011φ35混合纤维素酯微孔滤膜0.45um92
F0633-50MGFITC (Fluorescein Isothiocyanate) 异硫清酸荧光素3326-32-750MG
Brilliant Green25g
噻本隆25mgSERPINA6 Others Mouse 小鼠 SerpinA6 / CBG 人细胞裂解液 (阳性对照)
WST-1细胞活力和增殖检测试剂盒WST
CHL 中国仓鼠肺细胞
CL-0054Calu-3(人肺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)
EB病毒转化的人B淋巴细胞(拉祜族);KM9406 人冠状动脉内皮细胞*培养基 100mL
衣原体通用PCR检测试剂盒SulfiteAgar
类杆菌-胆汁-七叶苷(BBE)琼脂 250g 用于脆弱拟杆菌群的分离培养
KF链球菌琼脂 KF Streptococcus Agar 100 用于链球菌的选择性分离及计数(SN标准)
SS琼脂250g/瓶用于肠道菌选择性分离incubationmediaSS琼脂250g/瓶用于肠道菌选择性分离
含酶接触皿培养基平板(6.5cm) 10个/包 用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测小鼠脂联素 进口分装 Dihydrocurcumenone Dihydrocurcumenone 142717-57-5 C15H24O2 ≥98%
小鼠纤维连接蛋白 进口分装 Scabertopin Scabertopin 185213-52-9 C20H22O6 ≥98%
小鼠巨噬细胞炎性蛋白-3α 进口分装 Cinobufotalin Cinobufotalin 1108-68-5 C26H34O7 ≥98%
小鼠组织多肽抗原 进口分装 Secoisolariciresinol Diglucoside Secoisolariciresinol Diglucoside 148244-82-0 C32H46O16 ≥98%CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人细胞裂解液 (阳性对照)
输尿管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
大鼠气管上皮细胞;RTE
PG49细胞,人肺腺癌细胞系 转S9基因仓鼠卵巢细胞,ZA1细胞 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
SVEC4-10(小鼠淋巴结内皮细胞) 5×106cells/瓶×2
HDLEC-c adult 人类皮肤淋巴管内皮细胞(HDLEC)来自成年捐献者 500,000cells 颌下腺上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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