当前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 50T溶藻弧菌PCR检测试剂盒
本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | Vibrio alginolyticusPCR |
货号 | XG-P2258 |
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存
2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。
使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
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沙氏葡萄糖液体培养基Sabouraud’sGlucoseBrothMedium用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测
AnaerobicBeefLiverBroth哥伦比亚琼脂培养基 进口分装 1H-Benzotriazole-6-sulfonyl Chloride 中文名称: 1h-benzotriazole-6-sulfonyl化 CAS 编号: 70938-45-3 分子结构式: C6H4ClN3O2S
缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基) 进口分装 2,3-Dimethyl-6-nitro-2H-indazole 中文名称: 2,3-dimethyl-6-nitro-2h-indazole CAS 编号: 444731-73-1 分子结构式: C9H9N3O2
DNA 进口分装 Methyl 3,4-Dimethoxy[7-13C]-benzoate 中文名称: 3,4- [ 7到13 ]苯 CAS 编号: 1189921-34-3 分子结构式: C913CH12O4
玫瑰红钠琼脂颗粒培养基 进口分装 * 标准品别名: 棉酚-乙酸;棉子酚-乙酸;棉子酚乙酸酯 英文名称: Gossypol-acetic acid CAS 编号: 12542-36-810. 尿道细胞系统
新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF
CL-0171NIH/3T3(小鼠胚胎细胞)5×106cells/瓶×2
人癌细胞;MDA-MB-468 大鼠小脑颗粒细胞*培养基 100mL
Pcc4 小鼠畸胎瘤细胞
SIRPG Others Human 人 SIRPG / CD172g 人细胞裂解液 (阳性对照)
溶藻弧菌PCR检测试剂盒发光假蜜环菌
黑曲霉菌CMCC98003冻干粉
沙门氏菌IV
臭曲霉
斯氏油脂酵母
费氏志贺氏菌(福氏志贺氏菌)TWEEN80吐温80蛋白组学级金黄色-黄色粘稠液体RTsigma
四硼醋内. 十水 wo7ium tqtrcborctq dqcchydrctq 1303-96-4
5-Acetamido-2-nitnopxenylboronic aci 78887-36-2
隐绿原酸 Cryptochlorogenic acid (≥98%,HPLC) 905-99-7 20MG 标准品
L(-)钠/钠/L-钠/L-(+)-Tartaric acid disodium salt AR,99% 500克 国产/进口FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照)
球状少突细胞培养基OsM-prf
EC-304? 人血管内皮细胞
CM-M054小鼠成纤维细胞*培养基100mL
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0904 表皮角化细胞*培养基 100mL
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
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