50T-库皮科斯病毒PCR检测试剂盒-上海西格生物科技有限公司

产品名称：库皮科斯病毒PCR检测试剂盒
英文名称：Cupixi virus(CPXV)RTPCR
编号：XG-P1305
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

编号	成分	十孔盒包装（去纸托）
试剂一	2×PCR MagicMix	1mL（亮黄盖）
试剂二	源性成分 PCR 引物混合液	100 uL（白盖）
试剂三	源性成分 PCR 阳性对照	50 uL（黄盖）
试剂四	超纯水	1 mL（本色盖）
试剂五	DNA 释放剂试用装	50 次（成分见下）
试剂六	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一	50 uL（白盖）
试剂七	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二	100uL（绿盖）
试剂八	免 DNA 提取试剂溶液 B	400 uL（红盖）
试剂九	使用手册	400 uL（红盖）

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

胰胨琼脂培养基250g用于鱼类细菌病中病原菌的分离培养

D/E中和琼脂能中和抗微生物的化学试剂，用于环境标本中检测和计数表面微生物 500g incubation media D/E中和琼脂能中和抗微生物的化学试剂，用于环境标本中检测和计数表面微生物 500g

多黏类芽孢杆菌 fungus resistance testing electrical and electronic equipment [11793] produces mycophenolic acid [59296] 生产酶酚酸支/瓶

结晶紫中性红胆盐琼脂平板(9cm)用于大肠菌群的固体平板检测

Littman琼脂 250g 用于真菌的分离培养二乙二醇DiglycolGC2ml

SM0643O`RangeRuler 500bp DNA Ladder, ready-to-use191

B0588-1KGBoric Acid 硼酸10043-35-31kg

柠檬酸250g

X-Gal10gACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照)

胰岛素铁硒传递蛋白 100xITS

人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH

HepG2.2.15细胞，表达HBV病毒的人肝细胞小鼠胃癌细胞,MFC细胞非洲绿猴肾细胞;VERO

MG-63(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-23060 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium, 骨骼肌细胞生长培养基(即用型) 500ml
库皮科斯病毒PCR检测试剂盒SabouraudDextroseAgar

克氏枸橼酸盐培养基 250(g) incubation media 克氏枸橼酸盐培养基 250(g)

3.5% NaC1阿拉伯糖发酵管 3.5% NaC1阿拉伯糖发酵管 20支 BR

液体硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂)250用于混浊制品需氧菌无菌试验(GB标准)incubationmedia液体硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂)250用于混浊制品需氧菌无菌试验(GB标准)

Mueller-Hinton琼脂(MHA) 250g 用于弯曲杆菌的药物敏感性试验MEI培养基1000ml用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌进口分装硼标准溶液（1000μg/ml,溶剂：水） Boron solution ： 7440-42-8 质量规格： 1000μg/ml,溶剂：水

10%NaClTrypticSoyBroth 进口分装锰标准溶液(1000μg/ml,基质:1.0 mol/L HNO3) Manganes solution ： 7439-96-5 质量规格： 1000μg/ml,基质:1.0 mol/L HNO3

40%UreaWater 进口分装锡标准溶液(1000μg/ml) Tin standard ： 7440-31-5 质量规格： 1000μg/ml

吲哚培养基（蛋白胨水）10g生化培养基，用于细菌靛基质试验，亦称色酸肉汤（SN标准）进口分装二苯砜(标准品) Diphenyl sulfone ： 127-63-9 质量规格：分析标准品,>99.5%CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠胚胎成纤维细胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)

LNCaP 前列腺癌

Hs 578T人癌细胞 Hs human breast cancer cell line 578T DMEM+10%FBS

ADIPOQ Protein Human 重组人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 标签)

人胚肺成纤维细胞;MRC-5 QBC-939, 人胆管癌细胞 Human

技术原理：

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。