登革病毒3型PCR检测试剂盒 返回列表页

产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

使用及效果：将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1  确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中，向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2  将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中，静置2min。
3  12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
       若溶液体积大于纯化柱容积（800 μl），可分两次离心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释，即含80%乙醇。
       此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质，以获得高质量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
6  12,000 rpm 离心 3min，以*去除纯化柱中的液体。
   注：此步骤的作用是去除残留乙醇，避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7  将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处，悬空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃预热），静置2min。12,000 rpm 离心1min，管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5，加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
       对溶液Eluent 60℃预热，会提高提取DNA目的段的产量。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

胰膘肉汤基础用于肺炎链球菌、布鲁氏菌属细菌的培养

M17 broth acc.to TERZAGHI M17肉汤 1.15029.0500 MERCK默克 incubation media M17 broth acc.to TERZAGHI M17肉汤 1.15029.0500 MERCK默克

营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基) 250g 用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ，GB/T47...

Wistar大鼠星形胶质细胞*培养基MediumWistarofastrocytesinrats

饮用水和水源水检验培养基十八烷OctadecaneGCS2ml

12-0200-2200 μl 硅化吸头 With barrier198

A2203-250MGAcetosyringone 乙酰丁香酮2478-38-8250mg

磷酸肌酸二钠5g

酵母氮源基础,无392YNB100gLAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照)

人整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100]

CM-H042人肝内胆管上皮细胞*培养基100mL

HCT116细胞，人结直肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,HME1细胞 人胚肺二倍体细胞;KMB-17

GBC-SD(人胆囊癌细胞) 5×106cells/瓶×2

BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
登革病毒3型PCR检测试剂盒RoseBengalAgarMedium

嗜盐菌选择性琼脂 250(g) incubation media 嗜盐菌选择性琼脂 250(g)

液体乳糖培养基 Lactose Medium 250克 用于食品中沙门氏菌检验前增菌培养

细菌L型增菌液65用于L型细菌增菌培养incubationmedia细菌L型增菌液65用于L型细菌增菌培养

Xylose-gelatinmedium液体硫乙醇酸盐培养基  进口分装  DL-甲;蛋酸  DL-Mine  ：  59-51-8  质量规格：  >99%,BR

霉菌培养基  进口分装  DL-高苯丙酸  DL-Homophenylalanine  ：  1012-05-1  质量规格：  >98%,BR

CzapekDoxAgar  进口分装  L-正亮酸  L-Norleucine  ：  327-57-1  质量规格：  >98%,BR

高渗真菌学琼脂  进口分装  V钾  Penicillin V potassium salt  ：  132-98-9  质量规格：  1440~1680 U/mg,BRPLBD2 Others Human 人 PLBD2 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]

CM-M053小鼠卵巢上皮细胞*培养基100mL

CaEs-17细胞，人食管癌细胞 人脑瘤细胞,SF767细胞 叙利亚仓鼠肌肉细胞;GH-M1

CaES-17(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2

CD55 Others Human 人 CD55 / DAF 人细胞裂解液 (阳性对照)