登革病毒4型PCR检测试剂盒 返回列表页

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

产品名称：登革病毒4型PCR检测试剂盒
英文名称：Dengue Virus(DENV)4RTPCR
编号：XG-P1320
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

技术原理：

       DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

伊红美蓝琼脂培养基(Levine)250g弱选择性培养基，用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌

大肠杆菌O157显色培养基 1000mL/瓶 incubation media 大肠杆菌O157显色培养基 1000mL/瓶

氯化镁孔雀绿增菌液(MM) 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养

琼脂培养基CAgarmediumC用于霉菌和酵母菌的分离培养

BLB培养基 250g 用于双歧杆菌的分离培养1-十八醇1-octadecanolGCS1g

11-1000-21000 μl 硅化吸头 W/0 barrier181

A2203-1GAcetosyringone 乙酰丁香酮2478-38-81g

Creatine Phosphate, Diwo7ium Salt, Tetrahydrate10g

YNB500gRP2 Others Human 人 XRP2 / RP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0257BC-009(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

人前列腺成纤维细胞cDNAHPrF cDNA

C6细胞，脑胶质瘤细胞 人肺巨细胞癌细胞,HLAmP细胞 肺大动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)

EM1 Others Human 人 EM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
登革病毒4型PCR检测试剂盒Reinforcedmediumforclostridia

HE琼脂(HE) Hektoen Enteric Agar 用于沙门氏菌的选择性分离培养(GB标准)

麦芽浸汁 Malt extract 100克 BR

Bolton增菌培养基250g/瓶用于弯曲菌选择性增菌，每培养基中添加07cubationmediaBolton增菌培养基250g/瓶用于弯曲菌选择性增菌，每培养基中添加0710

BufferedMUGAgarIntergratedPotatoMedium  进口分装  Z-L-酪酸甲酯  Z-Tyr-OMe  ：  13512-31-7  质量规格：  >98%,BR

紫红胆盐葡萄糖琼脂  进口分装  N-BOC-O-苄基-L-丝酸  N-BOC-O-Benzyl-L-serine  ：  23680-31-1  质量规格：  0.98

亚碲酸盐肉汤培养基基础  进口分装  N-[(9H-芴-9-甲氧基)羰基]-N'-[(2-丙烯氧基)羰基]-L-赖酸  Fmoc-Lys(Alloc)-OH  ：  146982-27-6  质量规格：  >98%,BR

沙氏葡萄糖液体培养基  进口分装  固红 3 GL  Fast Red 3 GL Salt  ：  14263-89-9  质量规格：  BSFKBP7 Others Human 人 PPIase / FKBP7 人细胞裂解液 (阳性对照)

黑色素细胞培养基-2(不含TPA)MelM-2

大鼠胰腺导管上皮细胞*培养基 100mL

NCI-H266人非小细胞肺癌细胞 NCI-H266 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS

NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签)

M-NFS-60 (小鼠白血病细胞G-CSF依赖性) 5×106cells/瓶×2 肾系膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。