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产品名称:多里病毒PCR检测试剂盒
英文名称:Dhori VirusRTPCR
编号:XG-P1326
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分:
编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
试剂九 | 使用手册 | 400 uL(红盖) |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线
一次性卫生用品检验检验培养基
改良Y培养基 Agar Y,Modified 用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌
抗生素7号培养基 Antibiotic Agar NO.7 250克 头孢噻圬钠等的效价测定
SD-39琼脂250用于滤膜法大肠杆菌0离培养(NEOGEN方法)incubationmediaSD-39琼脂250用于滤膜法大肠杆菌0离培养(NEOGEN方法)
Enterotoxintoxin-producingmedium乙二醇GlycoGCS2ml
ER1631OliI (AleI)200 units3
D0340-1GVitamin H (D-Biotin) 维生素H (D-)58-85-51g
Crystal violet25g
ZeocinCN4 Others Human 人 Coactin 4 / CN4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9402
CM-H054人宫成纤维细胞*培养基100mL
MDA-MB-231, 人癌细胞 骨髓瘤,P3-X63-Ag8细胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌细胞)
小鼠正常肝细胞;NCTC 1469 [NCTC1469]
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
多里病毒PCR检测试剂盒Rappaport-VassiliadisMdeium
JM培养基基础 250g 海博新产品
三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar 250 生化培养基,用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(GB、SN标准)
incubationmedia
NalidixicAcid鸡细胞凋亡抑制因子elisa试剂盒 进口分装 (标准品) Nitrendipine : 39562-70-4 质量规格: 含量测定
人心肌锚蛋白重复域1elisa试剂盒 进口分装 糠胺,2-呋喃胺 Furfurylamine : 617-89-0 质量规格: >98%,油状液体,*
牛活化素elisa试剂盒 进口分装 灵芝酸F(标准品) Ganoderic acid F : 98665-14-6 质量规格: HPLC≥98%,标准品
山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa试剂盒 进口分装 4-硝基苯基-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷 4-Nitrophenyl-N-acetyl-beta-D-galactosaminide : 14948-96-0 质量规格: >98%,BRIFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照)
叙利亚仓鼠细胞系;Syrian Hamster AV12
角膜上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
BB7.2细胞, 分泌A2抗体B淋巴细胞 大鼠肉瘤细胞,WK256细胞 人脐动脉平滑肌细胞裂解物HUASMCL
NCI-H524(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CHO-K1(仓鼠卵巢细胞亚株) 5×106cells/瓶×2 CL-0126JAR(人胎盘绒毛膜癌细胞)5×106cells/瓶×2 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C8
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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