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产品名称:产气肠杆菌PCR检测试剂盒
英文名称:Enterobacter aerogenesPCR
编号:XG-P1373
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分:
编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
试剂九 | 使用手册 | 400 uL(红盖) |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线
亚碲酸钾(亚碲酸盐肉汤冻干配套试剂)SR00602mg/支x添加于(0220成亚碲酸盐肉汤。
Tryptone 胰蛋白胨 500g incubation media Tryptone 胰蛋白胨 500g
新月弯孢霉 葡萄酒酵母,耐高温达55℃ 支/瓶
Andrade'sCarbohydradeBroth
AFPA环己醇Cyclohexanol色标5ml
ER0521KpnI4000 units14
GE859-250MGG-418 sulfate [Geneticin]108321-42-2250MG
葡聚糖25g
D-α-丙胺酸D-α-alaninepR1gSIRPA Others Mouse 小鼠 SIRP alpha / CD172a 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-H116人脑动脉血管平滑肌细胞*培养基100mL
小鼠视网膜色素上皮细胞*培养基 100mL
RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 RAW 264.7 macrophages in leukemia cells DMEM+10% FBS
IL17A Protein Mouse 重组小鼠 IL17 / IL17A 蛋白
人少突胶质前体细胞(HOPC)(贴壁生长) 人间充质干细胞-肝 AGS人胃腺癌细胞
产气肠杆菌PCR检测试剂盒photobacteriumMedium
50130 去氧胆酸钠 BR 100g 细菌培养基的选择性抑制剂 incubation media 50130 去氧胆酸钠 BR 100g 细菌培养基的选择性抑制剂
龟裂链霉菌 分离源:电器 支/瓶
2×YT肉汤250用于基因工程菌大肠杆菌培养
改良察氏液体培养基 250g 用于霉菌的增菌培养人毒蕈碱型受体M2(CHRM2)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 526-31-8 Abrine C12H14N2O2 218.25 Alkaloids >=98% 20mg
人XIIIA1多肽(F13A1)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 776-86-3 Isoscopoletin C10H8O4 192.17 Coumarins > 98% 10mg
人补体1抑制因子(C1INH)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 13395-02-3 Aristololactam I C17H11NO4 293.27 Alkaloids >=98% 20mg
人亚甲基四氢还原酶(MTHFR)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 89590-95-4 Mogroside IV C54H92O24 1125.31 Triterpenoids >=98% 20mgSERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 SerpinC1 / AithrombinIII / ATIII 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1
CNE-2Z 人鼻咽癌母系细胞
LLC-RFP-puro小鼠Lewis肺癌细胞 LLC-RFP-puro mice with Lewis lung cancer cells DMEM+10%Hyclone 灭活血清+2ug/ml puromycin
TNFSF4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 标签)
人心室成纤维细胞 (HCFav)( 5×105 ) 293A,人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别) Human
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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