超广谱内酰胺酶肺炎克雷伯菌PCR检测试剂盒 返回列表页

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

产品名称：超广谱内酰胺酶肺炎克雷伯菌PCR检测试剂盒
英文名称：ESBLKlebsiella pneumoniaeβPCR
编号：XG-P1417
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

技术原理：

       DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

西蒙氏柠檬酸盐培养基2200g用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验

12201 BYP 琼脂培养基基础 250g/瓶 用于巴斯德氏菌的选择性分离培养，需添加消化血液 incubation media 12201 BYP 琼脂培养基基础 250g/瓶 用于巴斯德氏菌的选择性分离培养，需添加消化血液

四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB) 300ml/袋*10 用于沙门氏菌选择性增菌培养

哥伦比亚CNA琼脂基础250g用于分离革兰氏阳性球菌

SkimMilkSucroseCaseinDigestAgarMediumEthylenediaminetetraacetic acid  四乙酸  60-00-4

2,2'-(Ethylenedioxy)diethanol  三乙二醇  112-27-6

1,2-Dim  乙二醇二甲醚  110-71-4

Oxalic acid dihydrate  草酸  6153-56-6LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 人细胞裂解液 (阳性对照)

人组织细胞淋巴瘤细胞;U937 [U-937]

MOLT-4 人急性淋巴母细胞白血病细胞

NCI-H1975人肺腺癌细胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

ADIPOQ Protein Mouse 重组小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 标签)

SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13 人胰岛β细胞*培养基 100mL
超广谱内酰胺酶肺炎克雷伯菌PCR检测试剂盒NutrientAgar

LB agar acc.to MILLER LB琼脂 1.10283.0500 MERCK默克 incubation media LB agar acc.to MILLER LB琼脂 1.10283.0500 MERCK默克

营养肉汤培养基 250g 用于一般细菌培养、复壮、增菌等，也可用于消毒剂定性消毒效果测定。(《中华人民共和国药典》20...

兔脂肪间质干细胞成软骨诱导分化*培养基Rabbitadiposederivedmesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium

MaltExtractBrothRAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)  进口分装  兔血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒

SVEC4-10(小鼠淋巴结内皮细胞)  进口分装  兔抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒

BGC-803(人胃癌细胞)  进口分装  山羊(Cortisol)ELISA试剂盒

NCI-H1975(人肺腺癌细胞)  进口分装  人总铁结合力（TIBC）ELISA试剂盒HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

CM-R087大鼠软骨细胞*培养基100mL

小鼠海马趾星形胶质细胞MA-h

猴肾细胞;Vero IgCD4 人巨核细胞白血病，CHRF细胞 SK-N-MC(神经上皮瘤细胞)

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928

GFRA2 Others Mouse 小鼠 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人细胞裂解液 (阳性对照) 

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。