当前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 50T大拟片形吸虫PCR检测试剂盒
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线
产品名称:大拟片形吸虫PCR检测试剂盒
英文名称:Fasciola magnaPCR
编号:XG-P1428
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分:
编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
试剂九 | 使用手册 | 400 uL(红盖) |
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
我妻氏培养基基础250g用于副溶血性弧菌神奈川现象试验(GB标准、SN)
BM液体培养基 250g 用于醋酸钙不动杆菌增菌培养
O157显色培养基 O157 Chromogenic Medium 1000ml 用于O157菌的显色培养
酵母粉琼脂250g/瓶用于水中细菌总数的测定(ISO)incubationmedia酵母粉琼脂250g/瓶用于水中细菌总数的测定(ISO)
无菌病毒运输液(VTM) 3ml/支*36 用于甲流病毒标本运送N-Boc-(2S,3S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1-pentanol N-Boc-L-异亮醇 106946-74-1
Geneticin G-418 盐 108321-42-2
L-(+)-Isoleucinol L-异亮醇 24629-25-2
N-FMOC-ETHANOLAMINE 2-(N-芴甲氧羰基基)乙醇 105496-31-9VIPR2 Others Human 人 VIPR2 / VPAC2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人表皮角质细胞-胎儿HEK-f
兔眼Tenon's囊成纤维细胞;RYTF
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1 腺癌细胞,SK-BR-3细胞 RK-13细胞,兔肾细胞系
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 Human
CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大拟片形吸虫PCR检测试剂盒NitrateBroth
品红亚钠琼脂 Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar 用于饮用水,水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证(GB标准)
ASS 琼脂 Antibiotic sulfonamide sensitivity-test agar 250 用于磺胺类灵敏度试验(WHO方法)
轻唾琼脂培养基250g/瓶用于轻唾链球菌的分离培养,每基中添加805或每培养基中添加2支205cubationmedia轻唾琼脂培养基250g/瓶用于轻唾链球菌的分离培养,每基中添加805或每培养基中添加2支20518
LST-MUG甲磺酸加贝酯 进口分装 人5羟色胺转运受体蛋白ELISA试剂盒
戊酸雌二醇 进口分装 犬转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒
艾地苯醌 进口分装 犬肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒
进口分装 牛载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照)
原代肾实质细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2
Calu-6细胞,人肺癌细胞系(未分化) 大鼠肝星形细胞,CFSC-2G细胞 CM-M097小鼠皮下脂肪细胞*培养基100mL
SK-BR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HUAEC-c 人脐动脉内皮细胞(HUAEC) 500,000cells 肠静脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。