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使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | Enterococcus duransPCR |
货号 | XG-P1378 |
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
亚铋琼脂(BS)250g用于沙门氏菌的选择性分离(GB、SN标准)
牛肝颗粒 100g 同肝汤配套使用
嗜盐菌选择性琼脂 Halophilic Bacteria Selective Agar 250 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养(GB标准)
White培养基250g/瓶用于植物组织培养,适合于根的培养incubationmediaWhite培养基250g/瓶用于植物组织培养,适合于根的培养
含225mlmEC+n肉汤均质袋 10个/包 用于大肠杆菌O157菌前增菌培养录代正丙烷Chloro-propane色标5ml
ER0492HincII (HindII)2500 units16
C9754-100MGColchicine (秋水仙素)64-86-8100mg
D-Fructose500g
DL-精安酸DL-argininepR5gFCER2 Others Rat 大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 人细胞裂解液 (阳性对照)
原代软骨细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml
中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24
HLF-02细胞,人胚肺二倍体细胞 大鼠肝星形细胞,CFSC-3H & 5H细胞 CM-M120小鼠角膜上皮细胞*培养基100mL
SK-Hep-1(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC-c pooled 混合来源的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 500,000cells 肠粘膜上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
耐久肠球菌PCR检测试剂盒PhenolRedDextroseBroth
西蒙氏枸橼酸盐琼脂 Simmons Citrate Agar 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)
胰蛋白胨水培养基 Peptone Water Medium 250 用于靛基质试验
乙基紫叠钠肉汤EVA250g/瓶用于链球菌的增菌培养incubationmedia乙基紫叠钠肉汤EVA250g/瓶用于链球菌的增菌培养
SorbitolMacConkeyAgarAdditives人血小板衍生生长因子亚基A(PDGFA)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 茴芹内酯 英文名称: Pimpinellin : 131-12-4 分子式: 246.2155 分子量: C13H10O5
人磷脂酶A1(PLA1)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 儿 英文名称: Er : 154-23-4 分子式: 290.26806 分子量: C15H14O6
人末端运动神经元生存蛋白1(SMN1)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 1, 5-二酰奎宁酸 英文名称: 1, 5- two Coffee caffeoylquinic acid : 分子式: 516.45086 分子量: C25H24O12
人角膜蛋白(KERA)酶联免疫吸附测定试剂盒 进口分装 冬凌草甲素 英文名称: Oridonin : 28957-04-2 分子式: 364.43272 分子量: C20H28O6SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人细胞裂解液 (阳性对照)
人肠平滑肌细胞cDNAHISMC cDNA
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B4
Bel-7402细胞,人肝癌细胞 人胚纤维细胞系,HEF细胞 大鼠纤维母细胞;1/EJ 1-1
KU812(人外周血嗜碱性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28011 Mesenchymal Stem CellAdipogenic Differe. Medium, 间充质干细胞成脂分化培养基(即用型) 100ml
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。
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