口蹄疫病毒亚型PCR检测试剂盒 返回列表页

产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

使用及效果：将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1  确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中，向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2  将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中，静置2min。
3  12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
       若溶液体积大于纯化柱容积（800 μl），可分两次离心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释，即含80%乙醇。
       此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质，以获得高质量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
6  12,000 rpm 离心 3min，以*去除纯化柱中的液体。
   注：此步骤的作用是去除残留乙醇，避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7  将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处，悬空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃预热），静置2min。12,000 rpm 离心1min，管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5，加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
       对溶液Eluent 60℃预热，会提高提取DNA目的段的产量。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

头孢磺啶(MUGal肉汤冻干配套试剂)SR005mg/支x添加于(02205MUGal肉汤。

LAB-LEMCO( ) 肉汤 Lab-Lemco Broth Oxoid 500g incubation media LAB-LEMCO( ) 肉汤 Lab-Lemco Broth Oxoid 500g

明亮发光杆菌 支/瓶

SorbitolMacConkeyAgarAdditives

PPLOBrothAntimony triacetate  醋酸锑  6923-52-0

ANTIMONY PENTAFLUORIDE  五化锑  7783-70-2

Tungsten trioxide  三氧化钨  1314-35-8

cis-1,4-Dichloro-2-butene  顺-1,4-二-2-丁烯  1476-11-5IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照)

原代上皮细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml

大鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基 100mL

VERO C1008 (E6)非洲绿猴肾细胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培养基+10%FBS

IFNA1 Protein Rat 重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 标签)

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中国仓鼠肺细胞)
口蹄疫病毒亚型PCR检测试剂盒MZACAgar

25L incubation media 25L

抗生链霉菌 产磷酸二脂酸 支/瓶

VTMBroth

ColumbiaBloodAgarMedium真菌和酵母用蛋白酶抑制剂复合物 100 x  进口分装  人绒癌细胞耐药株

四甲基氯化铵(>99%,BR)  进口分装  人导管癌细胞

40%乙醛溶液  进口分装  人皮肤成纤维细胞

SefinoseTM CL-6B琼脂糖  进口分装  人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人细胞裂解液 (阳性对照)

豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4

JEG-3 人绒毛膜癌细胞

WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞 WPMY-1 of normal human prostate somal immortalized cell DMEM+5%FBS

VEGFC Protein Human 重组人 VEGF-C 蛋白 (His 标签)

小鼠条纹神经细胞(MN-s)(1×106) 5-8F, 人高转移鼻咽癌细胞系 Human