50T-口蹄疫病毒通用PCR检测试剂盒-上海西格生物科技有限公司

产品名称：口蹄疫病毒通用PCR检测试剂盒
英文名称：FootandMouth Disease Virus(FMDV)RTPCR
编号：XG-P1448
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

编号	成分	十孔盒包装（去纸托）
试剂一	2×PCR MagicMix	1mL（亮黄盖）
试剂二	源性成分 PCR 引物混合液	100 uL（白盖）
试剂三	源性成分 PCR 阳性对照	50 uL（黄盖）
试剂四	超纯水	1 mL（本色盖）
试剂五	DNA 释放剂试用装	50 次（成分见下）
试剂六	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一	50 uL（白盖）
试剂七	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二	100uL（绿盖）
试剂八	免 DNA 提取试剂溶液 B	400 uL（红盖）
试剂九	使用手册	400 uL（红盖）

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

铁琼脂250g用于军团菌的选择性分离培养(ISO标准)

MUELLER-HINTON agar .to NCCLS MUELLER-HINTON琼脂 1.05435.0500 MERCK默克 incubation media MUELLER-HINTON agar .to NCCLS MUELLER-HINTON琼脂 1.05435.0500 MERCK默克

改良Y培养基 250g 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性分离和培养

兔脂肪间质干细胞*培养基Rabbitadiposederivedmesenchymalstemcellsculturemedium

1.2mg/支*5 用1ml无菌水溶解后添加于100ml HB0256中TRIETHYLGERMANIUM CHLORIDE 三乙基化锗 994-28-5

TRIMETHYLGERMANIUM CHLORIDE *基化锗 1529-47-1

Strontium hydrogenphosphate 磷酸氢锶 13450-99-2

Strontium titanate 钛酸锶 12060-59-2IFNA4 Others Human 人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810]

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7

SW-13细胞，肾上腺皮质腺癌细胞黑色素瘤,Bowes Melanoma细胞人肺癌细胞;A549 [A-549]

小鼠肝癌瘤株;H22

SPARC Others Human 人 SPARC / Osteonectin 人细胞裂解液 (阳性对照)
口蹄疫病毒通用PCR检测试剂盒MycoplasmaBrothMedium

氯-蛋白胨缓冲液(pH7.0) 250(g) incubation media 氯-蛋白胨缓冲液(pH7.0) 250(g)

月桂基盐胰蛋白胨肉汤(LST) 250g 用于多管发酵法测定大肠菌群和粪大肠菌GB 4789.3-2010，GB/T 4789.38-2008，GB/T 4789.39-200...

抗生素检定培养基6号AntibioticAgarNO.6用于粘菌素等的效价测定

缓冲甘油-氯溶液 250g 用于检测产气荚膜梭菌时样品的贮存硝酸铈六水进口分装直结肠平滑肌细胞

呋喃三嗪二钠盐进口分装淋巴内皮细胞

焦磷酸钾(>97%,BC) 进口分装脑静脉血管内皮细胞

1 kb DNA Marker R,即用型进口分装膀胱成纤维细胞CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人细胞裂解液 (阳性对照)

角腊上皮细胞生长添加物CEpiCGS

人骨肉瘤细胞;HOS

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] T淋巴细胞白血病细胞，HuT78细胞 Mv.1.Lu(NBL-7)细胞，貂肺上皮细胞

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系 Human

LCN1 Others Human 人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 人细胞裂解液 (阳性对照)

技术原理：

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。