当前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 50T人博卡病毒PCR检测试剂盒
本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | Human Bocavirus PCR |
货号 | XG-P1563 |
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分:
编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
试剂九 | 使用手册 | 400 uL(红盖) |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线
肉膏酵母葡萄糖琼脂250g用于厌氧菌培养
Fluid A incubation media Fluid A
岛青霉 能防治烟草赤星病,对阳性细菌、大肠杆菌、白色假丝酵母无作用。 支/瓶
ColumbiaBloodAgar
CornMeatMediumNA 海藻酸氢二铵
AMMONIUM POLYSULFIDE 多硫化铵 12259-92-6
2-Methoxyphenylboronic acid 2-甲氧基苯基硼酸 1395388
Tributyl borate 硼酸三丁酯 688-74-4ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人细胞裂解液 (阳性对照)
Saos-2,人成骨肉瘤细胞
人胚肺成纤维细胞;MRC-5
CCC-HEK-1细胞,人胚肾二倍体细胞 鼠逆转录酶病毒包装细胞,PT67细胞 CL-0398NCI-H2452(人间皮瘤细胞)5×106cells/瓶×2
COLO 201(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
hMNC-CB-c pooledula-pure 脐带血来源的人类单核细胞 人前列腺微血管内皮细胞HPrMEC
人博卡病毒PCR检测试剂盒M250g用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养
志贺氏菌增菌肉汤 Shigiella Broth 用于志贺氏菌的选择性增菌培养
水解乳蛋白 Lactalbumin hydrolysate 250克 BR
Schaedler琼脂250g/瓶用于厌氧菌的分离培养,视情况加入VK维羊血incubationmediaSchaedler琼脂250g/瓶用于厌氧菌的分离培养,视情况加入VK维羊血
VRB-MUGAgar人血管内皮生长因子165elisa试剂盒 进口分装 朝藿定C(标准品) Epmedin C : 110642-44-9 质量规格: HPLC≥98%,标准品
人心型脂肪酸结合蛋白elisa试剂盒 进口分装 丹参素 Danshensu : 76822-21-4 质量规格: HPLC>95%,丹参提取
人胚胎性硫糖蛋白抗原elisa试剂盒 进口分装 豆甾醇 Stigmasterol : 83-48-7 质量规格: >90%,GC
人Ⅸelisa试剂盒 进口分装 1,3-二酰奎宁酸(标准品) Cynarin : 1182-34-9 质量规格: HPLC≥98%,标准品KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0114Hs 578T(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
人外根壳细胞裂解物HHORSCL
牛源细胞 肝癌细胞,HCCLM3细胞 C3细胞,小鼠白血病细胞
人胚肾细胞(SV40T基因修饰);293T/17
COCH Others Human 人 COCH / Cochlin 人细胞裂解液 (阳性对照)
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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