组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒 返回列表页

使用及效果：将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）
1  确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中，向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2  将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中，静置2min。
3  12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
       若溶液体积大于纯化柱容积（800 μl），可分两次离心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释，即含80%乙醇。
       此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质，以获得高质量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
6  12,000 rpm 离心 3min，以*去除纯化柱中的液体。
   注：此步骤的作用是去除残留乙醇，避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7  将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处，悬空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃预热），静置2min。12,000 rpm 离心1min，管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5，加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
       对溶液Eluent 60℃预热，会提高提取DNA目的段的产量。

肉汤培养基I250g用于沙门氏菌选择性增菌培养。

Antibiotic agar No1 GROVE and RANDALL medium No1抗生素琼脂1号 1.05272.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar No1 GROVE and RANDALL medium No1抗生素琼脂1号 1.05272.0500 MERCK默克

Fraser肉汤增菌液(FB1，FB2)基础 250g 用于李斯特氏的选择性增菌培养(SN/T0184.1-2005，ISO标准)。

琼脂基础NaHCO3AgarBase用于炭疽杆菌的荚膜培养

乳酸杆菌肉汤培养基 250g 用于乳酸杆菌增菌培养NA  紫尿酸铵

METHYLSUCCINIC ANHYDRIDE  2-甲基琥珀酸酐  4100-80-5

Ceric   铈铵  16774-21-3

SELE Others Cynomolgus 食蟹猴 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0407NCTC 1469(小鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2

人脑微血管内皮细胞RNAHBMEC miRNA5 μg

MCF-7/ADR细胞，人癌细胞(耐) 早代小鼠胚胎成纤维细胞,MEF细胞 AGS人胃腺癌细胞

MKN45(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC single donor Pellet 人脐静脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 球状少突细胞培养基OsM
组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒MaconkeyAgarMedium

李斯特氏菌显色培养菌(LA) 1000mL/瓶 incubation media 李斯特氏菌显色培养菌(LA) 1000mL/瓶

四硫磺酸钠煌绿增菌液基础(TTB) 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养(《中华人民共和国药典》2010年版)。

琼脂培养基BAgarmediumB(Caseinsoyabeandigestagar)一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养。

ChalmersAgar,ModifiedGramNegativeBacteriaSelectiveMedium  进口分装  琥珀酸；丁二酸(标准品)  Succinic acid  ：  110-15-6   质量规格：  >99%,标准品

ZymomonasMobilisTMedium  进口分装  辛辣内酯A（标准品）  Pungiolide A  ：  130430-97-6  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

Ironbacteriamedium  进口分装  12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate  12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate  ：  92214-54-5  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

Argininebroth  进口分装  dT亚磷酰胺单体  dT Phosphoramidite  ：  98796-51-1  质量规格：  >98%CD40LG Others Mouse 小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 人细胞裂解液 (阳性对照)

MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞

大鼠神经元细胞*培养基 100mL

OK负鼠肾细胞 OK opossum kidney cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS

IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 标签)

MS751(人宫颈表皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬细胞)

产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。