单孢子虫通用PCR检测试剂盒 返回列表页

产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。

产品名称：单孢子虫通用PCR检测试剂盒
英文名称：Haplosporidium spp.PCR
编号：XG-P1519
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

使用及效果：将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1  确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中，向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2  将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中，静置2min。
3  12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
       若溶液体积大于纯化柱容积（800 μl），可分两次离心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释，即含80%乙醇。
       此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质，以获得高质量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
6  12,000 rpm 离心 3min，以*去除纯化柱中的液体。
   注：此步骤的作用是去除残留乙醇，避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7  将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处，悬空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃预热），静置2min。12,000 rpm 离心1min，管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5，加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
       对溶液Eluent 60℃预热，会提高提取DNA目的段的产量。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

沙氏葡萄糖琼脂(SDA)250g用于真菌的分离培养

阪崎肠杆菌显色培养基 200g/瓶 incubation media 阪崎肠杆菌显色培养基 200g/瓶

弧菌显色培养基选择性添加剂冻干试剂 10支 每支添加于100ml(CRM008)弧菌显色培养基中。

增菌肉汤培养基EEnrichmentbrothmediumE用于肠杆菌科细菌的增菌培养

MRS琼脂 250g 用于食品中乳酸菌的分离培养或计数。Isopentyl   异戊醚  544-01-4

1,1'-Thiobisethane  乙硫醚  352-93-2

2-Phenyl-1-propene  α-  98-83-9

Isobutyl vinyl   基异丁醚  109-53-5SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照)

原代神经元细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0926

家猫肺细胞;FCA-L1 羊膜细胞，Ha Fe细胞 BaF3细胞，小鼠原B细胞株

人正常上皮细胞;MCF 10A

PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照)
单孢子虫通用PCR检测试剂盒MFB培养基250g用于李斯特氏菌的选择性增菌培养

胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定

葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth 250克 凝固酶阳生葡萄球菌选择性增菌

NZYM肉汤250g/瓶不含酸水解酪蛋白，用于大肠杆菌菌株培养，配方被用于重组l噬菌体的复制incubationmediaNZYM肉汤250g/瓶不含酸水解酪蛋白，用于大肠杆菌菌株培养，配方被用于重组l噬菌体的复制

阪崎杆菌分离琼脂(ESIATM) 250g 用于阪崎肠杆菌分离培养NLN培养基(含维生素)NLNMediumwithvitamins10升BR  进口分装  （标准品）  Repaglinide  ：  135062-02-1  质量规格：  >99%,BR

酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)  进口分装  环黄芪醇  Cycloastragenol  ：  84605-18-5  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

品红亚钠培养基（远藤琼脂培养基）  进口分装  6aR,11aR）3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷  3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan  ：  73340-41-7  质量规格：  HPLC≥98%，标准品

乳糖胆盐发酵培养基  进口分装  TAE684  NVP-TAE684  ：  761439-42-3  质量规格：  >98%,选择性的ALK抑制剂人气管上皮细胞(HTEpiC)(5×105 )

人葡萄膜黑色素细胞;UM

CL-0295MV3(人黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2B 大鼠皮下脂肪细胞*培养基 100mL

LM-8 小鼠骨肉瘤

WFDC2 Others Human 人 WFDC2 / HE4 / WAP5 人细胞裂解液 (阳性对照)