50T-副猪嗜血杆菌PCR检测试剂盒-上海西格生物科技有限公司

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

产品名称	副猪嗜血杆菌PCR检测试剂盒
英文名称	Haemophilus parasuisPCR
货号	XG-P1508

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

编号	成分	十孔盒包装（去纸托）
试剂一	2×PCR MagicMix	1mL（亮黄盖）
试剂二	源性成分 PCR 引物混合液	100 uL（白盖）
试剂三	源性成分 PCR 阳性对照	50 uL（黄盖）
试剂四	超纯水	1 mL（本色盖）
试剂五	DNA 释放剂试用装	50 次（成分见下）
试剂六	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一	50 uL（白盖）
试剂七	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二	100uL（绿盖）
试剂八	免 DNA 提取试剂溶液 B	400 uL（红盖）
试剂九	使用手册	400 uL（红盖）

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

技术原理：

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

沙氏琼脂培养基2250g用于真菌的分离培养，还用于一次性使用卫生用品真菌菌落总数检测

Peptone Special 特殊蛋白胨 Oxoid 500g incubation media Peptone Special 特殊蛋白胨 Oxoid 500g

玫瑰褐链霉菌支/瓶

aClTrypticaseSoyBroth

WheatalbomycinTestMediumIsobutylene oxide 甲基环氧丙烷 558-30-5

2,4-DIAMINOANISOLE 基苯甲醚 615-05-4

(Trifluoromethoxy)benzene *氧基苯 456-55-3

2-thiol 2-硫酚 91-60-1ACO1 Others Human 人 ACO1 / irp1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人表皮角质细胞RNAHEK miRNA5 μg

兔间变表皮鳞癌瘤株;VX2

BxPC-3细胞，原位胰腺腺癌细胞鼠骨髓瘤细胞,P3X63-Ag8.653细胞人食管癌细胞;EC109

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人细胞裂解液 (阳性对照)
副猪嗜血杆菌PCR检测试剂盒MiddleBrook7H250g用于分枝杆菌的分离培养

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3%氯胰蛋白胨大豆琼脂 250g 用于副溶血性弧菌的生长试验。(SN0173-2010和GB/T4789.7-2008)

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溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基 250g 用于压力蒸气消毒过程监测指示菌(嗜热脂肪杆菌芽孢)的培养及消毒效果测定TCH(噻吩-2-羧酸酰)0.1加入改良罗氏培养基中制成TCH培养基，用于分枝杆菌鉴定incubationmediaTCH(噻吩-2-羧酸酰)0.1加入改良罗氏培养基中制成TCH培养基，用于分枝杆菌鉴定进口分装舍林盐(标准品) Ketanserin Tartrate ： 83846-83-7 质量规格： HPLC>98%,标准品

醋酸盐鉴别琼脂250incubationmedia醋酸盐鉴别琼脂250 进口分装醋酸甲地孕（标准品） Megestrol Acetate ： 595-33-5 质量规格： HPLC>98%,标准品

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志贺氏菌显色培养基CRM0111000ml/瓶志贺氏菌显色培养基进口分装盐酸(标准品) Oxytetracycline HCl ： 2058-46-0 质量规格：效价测定MDK Others Human 人 Midkine / MDK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

心肌细胞培养基CMM-prf

EB病毒转化的人B淋巴细胞(傣族);KM9405

Hepa 1-6细胞，肝癌细胞人结直肠癌细胞,HCT116细胞 CM-H012人支气管平滑肌细胞*培养基100mL

大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3

CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 人细胞裂解液 (阳性对照)