当前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 50T悉尼马尔太虫PCR检测试剂盒
本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | Marteilia sydneyiPCR |
货号 | XG-P1720 |
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分:
编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
试剂九 | 使用手册 | 400 uL(红盖) |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线
马铃薯葡萄糖半固体琼脂250g用于椰毒假单胞酵米面亚种的产毒培养
RVS肉汤 250(g) incubation media RVS肉汤 250(g)
3% NaC1乳糖发酵管 3% NaC1乳糖发酵管 20支 BR
绿脓菌素测定培养基(PDP)250用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)incubationmedia绿脓菌素测定培养基(PDP)250用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)
PrestonBrothBaseBORON PHOSPHATE 磷酸硼 13308-51-5
METHYL VINYL /MALEIC ACID COPOLYMER 聚(甲基基醚共聚马来酸) 25153-40-6
Ruthenium(IV) oxide hydrate 氧化钌 32740-79-7
Ruthenium(III) chloride 三化钌 14898-67-0PNLIP Others Human 人 PNLIP 人细胞裂解液 (阳性对照)
615小鼠状肺腺癌瘤株;P615
MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]人骨肉瘤细胞 The MNNG/HOS Cl #5 human osteosarcoma cell line [R-1059-D] MEM培养基(GIBCO)+10%FBS
HEB细胞,人脑胶质细胞株(正常) 大肠埃希氏菌 人支气管平滑肌细胞总RNAHBSMC NA
RIN-m5f(大鼠胰岛β细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
F9(小鼠畸胎瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0290MDA-MB-468(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 犬肾细胞系/IgR;MDCK/IgR
悉尼马尔太虫PCR检测试剂盒GC琼脂250g用途:用于淋球菌的分离培养。
11965-084 1000ml incubation media 11965-084 1000ml
解淀粉芽孢杆菌 发酵木糖生产酒精 支/瓶
含酶接触皿培养基平板(6.5cm)用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测
MartinBroth,Modified10 x HBSS, 除去碳酸氢钙, 液体, 过滤灭菌 进口分装 牛陀螺装细胞
M9CA Broth 进口分装 小菊头蝠成纤维样细胞
重组蛋白A琼脂糖凝胶6B FF 进口分装 非何杰金氏淋巴瘤细胞
6 x RNA Loading Dye 进口分装 鼠结缔组织细胞胸苷激酶变异株COL4A3 Others Rat 大鼠 COL4A3 人细胞裂解液 (阳性对照)
狗肾恶性组织细胞增生症细胞;DH82
皮下脂肪细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
Hut-102细胞,人T淋巴瘤细胞系 Walker氏癌肉瘤256瘤株,W256细胞 人小气道上皮细胞裂解物HSAEpiCL
NCI-H226(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Caov-3(人乳突状卵巢腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0070CRFK(猫肾细胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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