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使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称:海鱼分枝杆菌PCR检测试剂盒
英文名称:Mycobacterium marinumPCR
编号:XG-P1773
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
酪蛋白琼脂28370用于鉴别蜡样芽孢杆菌分解酪蛋白试验(GB/T4789.28-2003中4.65,GB/T4789.03)。
产气荚膜菌琼脂基础 (TSC/SFP) (CM0587) Oxoid incubation media 产气荚膜菌琼脂基础 (TSC/SFP) (CM0587) Oxoid
特异青霉 支/瓶
胰蛋白胨胆盐琼脂250g用于大肠杆菌的膜过滤法选择性培养(ISO标准)
血液增菌培养基 250g 用于从血液中分离病原菌D-Glutamine D-谷酰胺 5959-95-5
D-Cysteine hydrochloride D-半胱酸盐酸盐 32443-99-5
D(-)-Isovaline D(-)-异缬酸 3059-97-0
2-(tert-Butyl)-4,6- 2,4-二甲基-6-叔丁基 1879-09-0RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人细胞裂解液 (阳性对照)
大隐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
大鼠皮肤肥大细胞*培养基 100mL
COS-7非洲绿猴SV40转化的肾细胞 Renal cell COS-7 in African green monkey SV40 ansformation DMEM培养基+10%FBS
IFNA2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (Fc 标签)
K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞) 5×106cells/瓶×2 溶组织梭菌Closidium histolyticum
海鱼分枝杆菌PCR检测试剂盒EF-250g用于滤膜法检测食品中沙门氏菌(SN/T1)
液体培养基 250g 用于甲烷菌计数培养
葡萄糖斜面琼脂 Arginine Dextrose Agar 100 用于霍乱弧菌的复合生化试验(SN标准)
5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶
PH7.0NaCl-PeptoneBuffer1%NaCl鸟酸脱羧酶生化鉴定管 进口分装 Captan 中文名称: 克菌丹 CAS 编号: 133-06-2 分子结构式: C9H8Cl3NO2S
鼠李糖生化鉴定管 进口分装 2-Hydroxythiepan Discontinued 中文名称: 2-hydroxythiepan停产 CAS 编号: 14769-30-3 分子结构式: C6H12OS
弧菌科细菌生化鉴定盒(16种×5次) 进口分装 重楼皂苷E 标准品别名: 次皂甙元 A;薯蓣次皂苷A;重楼皂苷V 英文名称: Progenin III CAS 编号: 19057-67-1
胰蛋白胨大豆肉汤颗粒培养基 进口分装 蝙蝠葛苏林碱 标准品别名: 英文名称: daurisoline CAS 编号: 70553-76-3IgG3 Others Human 人 IgG3-Fc / IGHG3 人细胞裂解液 (阳性对照)
心室肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
大鼠肾实质细胞*培养基 100mL
CTLA4 Ig-24中国仓鼠卵巢细胞 CTLA4 Ig-24 China hamster ovary cells DMEM培养基+10%FBS
NOV Protein Canine 重组狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签)
G1(发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠小胶质细胞RM
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。
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