50T-猫支原体PCR检测试剂盒-上海西格生物科技有限公司

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

产品名称	猫支原体PCR检测试剂盒
英文名称	Mycoplasma felisPCR
货号	XG-P1789

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

编号	成分	十孔盒包装（去纸托）
试剂一	2×PCR MagicMix	1mL（亮黄盖）
试剂二	源性成分 PCR 引物混合液	100 uL（白盖）
试剂三	源性成分 PCR 阳性对照	50 uL（黄盖）
试剂四	超纯水	1 mL（本色盖）
试剂五	DNA 释放剂试用装	50 次（成分见下）
试剂六	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一	50 uL（白盖）
试剂七	免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二	100uL（绿盖）
试剂八	免 DNA 提取试剂溶液 B	400 uL（红盖）
试剂九	使用手册	400 uL（红盖）

技术原理：

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

克氏双糖铁琼脂22240250g用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖，及产生硫化氢的生化反应

2 x YT Agar-capsule 培养基 5capsules incubation media 2 x YT Agar-capsule 培养基 5capsules

指状青霉支/瓶

肠球菌琼脂250g用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养

Stuart运送培养基 250g 用于致病菌标本的运送保存POTASSIUM TRIFLUOROMETHANESULFONATE *磺酸钾 2926-27-4

Potassium benzylpenicillin 钾 113-98-4

L-3-Pyridylalanine 3-(3-基)-L-丙酸 64090-98-8

3-(3-Pyridyl)-D-alanine 3-(3-基)-D-丙酸 70702-47-5IFNAR1 Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照)

CM-R068大鼠肾小管平滑肌细胞*培养基100mL

小鼠前脂肪细胞*培养基 100mL

B16-F0-EGFP (稳定株)小鼠黑色素瘤细胞 B16-F0-EGFP (stable sain) of mouse melanoma cells DMEM+10% FBS+200ug/ml G418

IL35 Protein Human 重组人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 标签)

WPMY-1(人正常前列腺基质永生化细胞) 5×106cells/瓶×2 C2C12, 小鼠肌原细胞
猫支原体PCR检测试剂盒DTM培养基250g用于食品中真菌的培养

CATC琼脂 250(g) incubation media CATC琼脂 250(g)

弧菌选择琼脂平板 TCBS Agar Plate 10块

D-环0.2加入250mlTSC琼脂基础中incubationmediaD-环0.2加入250mlTSC琼脂基础中

ArginineDextroseAgar7311-prfOEpiCM-prf上皮细胞培养基500mlincubationmedia7311-prfOEpiCM-prf上皮细胞培养基500ml 进口分装 Sauchinone 三白草 177931-17-8 20mg

11949MS培养基(不含琼脂和蔗糖)100L/瓶用于植物组织培养incubationmedia11949MS培养基(不含琼脂和蔗糖)100L/瓶用于植物组织培养进口分装 Galantamine hydrobromide 加兰他敏 19453 20mg

119361Kg/袋incubationmedia119361Kg/袋进口分装 Dendrobine 石斛碱 2115-91-5 20mg

11605大肠埃希氏菌O157显色培养基1000ml/瓶用于O157菌快速检测，O157菌显红色incubationmedia11605大肠埃希氏菌O157显色培养基1000ml/瓶用于O157菌快速检测，O157菌显红色进口分装 10-Gingerol 10-姜酚 23513-15-7 20mgLAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3

LA795瘤肺腺癌

SK-OV-3人卵巢癌细胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS

FLT3LG Protein Mouse 重组小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 标签)

小鼠骨髓间充质肝细胞(MMSC-bm)(5×105) PANC-1, 人胰腺癌细胞 Human

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。