口腔支原体PCR检测试剂盒 返回列表页

产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。

产品名称：口腔支原体PCR检测试剂盒
英文名称：Mycoplasma oralePCR
编号：XG-P1804
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

使用及效果：将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1  确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中，向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2  将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中，静置2min。
3  12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
       若溶液体积大于纯化柱容积（800 μl），可分两次离心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释，即含80%乙醇。
       此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质，以获得高质量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
6  12,000 rpm 离心 3min，以*去除纯化柱中的液体。
   注：此步骤的作用是去除残留乙醇，避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7  将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处，悬空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃预热），静置2min。12,000 rpm 离心1min，管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5，加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
       对溶液Eluent 60℃预热，会提高提取DNA目的段的产量。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

柯氏尿素琼脂250g用于细菌脲酶检测

气单胞菌培养基添加剂 5支 每支添加剂加入100ml气单胞菌培养基基础

WS 琼脂 WS Salmonella Agar 250 用于沙门氏菌的选择性分离(GB标准)

明胶培养基250g/瓶用于细菌的明胶生化试验incubationmedia明胶培养基250g/瓶用于细菌的明胶生化试验

GentamycinAgar4-(Trifluoromethylthio)phenol  4-*硫基*  461-84-7

5-Hydroxymethylfurfural  5-羟甲基糠醛  67-47-0

4-(Dimethylamino)cinnamaldehyde  4-(二甲基基)肉桂醛  6203-18-5

3,5-DICHLOROSALICYLALDEHYDE  3,5-二  90-60-8GADD45A Others Human 人 GADD45A / DDIT-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

平滑肌细胞培养基SMCM-sf

*;HEL

P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞，骨髓瘤细胞 人结肠癌细胞,SW620细胞 CM-H053人宫平滑肌细胞*培养基100mL

大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1

RK1 Others Human 人 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照)
口腔支原体PCR检测试剂盒DifferentiaReinforcedClostridialAgar

匹克氏肉汤基础A Pick’s Broth BaseA 用于溶血性链球菌的增菌培养

*敏感纸片 20片 炭疽杆菌检测用配套试剂

无菌试验用真菌培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验incubationmedia无菌试验用真菌培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验

R2A琼脂 250g 用于饮用水中细菌总数测定(USP、EP方法)TBX培养基TBXAgar1000ml用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时，显兰色  进口分装  尼达明  Lonidamine  ：  50264-69-2  质量规格：  >99%,BR

Endo培养基EndoAgar250用于大肠菌群的确诊试验(APHA)  进口分装  *(标准品)  Oxybutynin HCl  ：  1508-65-2  质量规格：  >98%,标准品

1%亚碲酸钾溶液5ml*10适量添加于HB0121  进口分装  /苄*(标准品)  Ampicillin Trihydrate  ：  7177-48-2  质量规格：  含量测定

WILKINS-CHALGREN琼脂WILKINS-CHALGRENAGAR250用于厌氧菌的分离培养(Acumedia方法)  进口分装  盐酸*  Bupivacaine HCl  ：  14252-80-3  质量规格：  >95%,USPCDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

牦牛皮肤细胞;BMU-S1

肾小球内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

草鱼肝脏细胞;L8824 人视网膜母细胞瘤，WERI-Rb-1细胞 KB(口腔表皮样癌细胞)

人脑瘤细胞;SF767

REG1B Others Human 人 REG1B / PSPS2 人细胞裂解液 (阳性对照)