消化链球菌通用PCR检测试剂盒 返回列表页

产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

使用及效果：将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1  确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中，向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2  将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中，静置2min。
3  12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
       若溶液体积大于纯化柱容积（800 μl），可分两次离心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
   注：溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释，即含80%乙醇。
       此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质，以获得高质量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
6  12,000 rpm 离心 3min，以*去除纯化柱中的液体。
   注：此步骤的作用是去除残留乙醇，避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7  将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处，悬空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃预热），静置2min。12,000 rpm 离心1min，管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用无菌双蒸水代替，但其pH需为8.0-8.5，加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
       对溶液Eluent 60℃预热，会提高提取DNA目的段的产量。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

硅酸盐细菌培养基(含琼脂)250g用于硅酸盐细菌的分离培养

微生物含量测试琼脂(胰蛋白大豆琼脂含和吐温80) 环境监测中的多种菌的计数 500g incubation media 微生物含量测试琼脂(胰蛋白大豆琼脂含和吐温80) 环境监测中的多种菌的计数 500g

多型孢毛霉 支/瓶

MFC琼脂平板(9cm)用于大肠菌群的滤膜法检测

YM琼脂 250g 用于霉菌,酵母菌及耐酸菌的分离培养ZINC SULFITE DIHYDRATE  亚锌  7488-52-0

2-Methylthiophene  2-噻吩  554-14-3

2-Bromothiophene  2-溴噻吩  1003-09-4

2-Iodothiophene  2-噻吩  3437-95-4LY96 Others Mouse 小鼠 LY-96 / ESOP-1 人细胞裂解液 (阳性对照)

CM-H117人脑静脉血管内皮细胞*培养基100mL

人膀胱微血管内皮细胞HBIMEC

hFOB 1.19细胞，人SV40转染成骨细胞 人癌细胞(耐),MCF-7/ADR细胞 小鼠小脑星形胶质细胞MA-c

牛陀螺状细胞;BT

LY86 Others Mouse 小鼠 LY86 / MD1 人细胞裂解液 (阳性对照)
消化链球菌通用PCR检测试剂盒BSSAagarmedium

50301 明胶 BR 500g incubation media 50301 明胶 BR 500g

海洋盐单胞菌 支/瓶

HB-PE自诱导培养基250用于基因工程菌大肠杆菌自诱导蛋白表达培养

FungalMedium鸡β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISAKit  进口分装  二-O-β-D-葡萄糖苷酸  Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide  ：  107136-95-8  质量规格：  美国进口

鸡催乳素(PRL)ELISAKit  进口分装  伐那非二盐酸  Vardenafil Dihydrochloride Salt  ：  224788-34-5  质量规格：  美国进口

鸡腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISAKit  进口分装  ent-  ent-Nateglinide  ：  105816-05-5  质量规格：  美国进口

大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISAKit  进口分装  (6S)-四-L-二生物蝶呤  (6S)-Tetrahydro-L-biopterin Disulfate  ：  103130-45-6  质量规格：  美国进口TNFRSF9 Others Canine 狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠肾足细胞;Mouse podocyte

CM-M005小鼠气管平滑肌细胞*培养基100mL

KYSE 450细胞，人食管鳞癌 神经胶质瘤细胞,CRT细胞 家兔肾细胞;RABK3

CCL-149(大鼠肺泡上皮细胞) 5×106cells/瓶×2

PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人细胞裂解液 (阳性对照)