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使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | Plasmodium vivaxPCR |
货号 | XG-P1930 |
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
哥伦比亚琼脂培养基2406g灭菌后冷至45℃左右时加入5%脱纤维羊血,用于空肠弯曲菌的培养。(CP、GB、EP、USP)
4651 CM 软骨细胞培养基 500 ml incubation media 4651 CM 软骨细胞培养基 500 ml
紫晶口磨 提高酒的含酯量,生香味 支/瓶
BETA-SSA琼脂250g用于链球菌的选择性分离培养
Cary-Blair氏运送培养基(不含琼脂) 250g 用于运送肠道致病菌。LITHIUM COBALT(III) OXIDE 钴酸锂 12190-79-3
TETRAPHENYLPHOSPHONIUM TETRAPHENYLBORATE 四苯基硼四苯基磷 15525-15-2
n-Butyllithium 正丁基锂 109-72-8
Tetrakis(hydroxymethyl)phosphonium chloride 四羟化磷 124-64-1CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
山羊肾上皮样细胞;DG-K1
腮腺细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd 人正常皮肤细胞,TE 353.Sk细胞 HO-8910(卵巢癌细胞)
人神经胶质细胞瘤细胞;U251
TNFRSF19 Others Mouse 小鼠 TNFRSF19 / OY 人细胞裂解液 (阳性对照)
疟原虫PCR检测试剂盒BrilliantGreenAgarw/Sulfadi
ISPMedium
改良BPLS琼脂 BPLS Agar,Modified 250 用于各种标本中沙门氏菌选择性分离培养(ISO标准)
Dey/Engley中和肉汤基础250g/瓶用于化妆品样品的制备和卫生环境中细菌的培养,每升培养基中需添加0204incubationmediaDey/Engley中和肉汤基础250g/瓶用于化妆品样品的制备和卫生环境中细菌的培养,每升培养基中需添加0204
HektoenEntericAgar谷草转酶(SGOT)测试盒 进口分装 白杨素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-毗喃葡萄糖苷 ≥98% 询价
中性酯酶染液 进口分装 川陈皮素 Nobiletin 478-01-3 C21H22O8 ≥98% 询价
超氧化物歧化酶(SOD)检测 进口分装 20283-92-5 Rosmarinic acid C18H16O8 360.31 Phenylpropanoids >=98% 20mg
钠钾、钙ATP酶中任一项检测 进口分装 76135-82-5 Glucosylvitexin C27H3O15 597.52 Flavonoids >=98% 20mg人肺动脉内皮细胞(HPAEC) ( 5×105 )
人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1
CL-0333E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人导管癌细胞;HCC38 大鼠关节软骨细胞*培养基 100mL
H22 小鼠肝癌细胞
DSC2 Others Human 人 DSC2 / Desmocollin-2 人细胞裂解液 (阳性对照)
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。
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