粘质沙雷菌PCR检测试剂盒 返回列表页

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

技术原理：

       DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

产组胺菌培养基250g用于产组胺菌分离培养。

TGE agar Tryptone glucose extract agarTCE 琼脂/胰蛋白胨葡萄糖琼脂 1.10128.0500 MERCK默克 incubation media TGE agar Tryptone glucose extract agarTCE 琼脂/胰蛋白胨葡萄糖琼脂 1.10128.0500 MERCK默克

三糖铁琼脂(TSI) 250g 用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化的生化反应

TetrathionateBrothBase

HCAgarBase人脂质运载蛋白1(LCN1)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装  481-49-2  Cepharanthine  C37H38N2O6  606.71  Alkaloids  >=98%  20mg

人精酸酶1(ARG1)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装  67-97-0  Vitamin D3  C27H44O  384.64  Miscellaneous  >=99%  20mg

人自身免疫调节因子(AIRE)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装  802048-02-8  Sorbic acid, 1-p-tolylhydrazide  C13H16N2O  216.28  Miscellaneous  >=98%  100mg

人癌易感蛋白2(BRCA2)酶联免疫吸附测定试剂盒  进口分装  521-34-6  Sciadopitysin  C33H24O10  580.6  Flavonoids  >=98%  20mg人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 )

小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)

CM-R088大鼠破骨细胞*培养基100mL

小鼠肺腺癌细胞系;LA795 小鼠食管平滑肌细胞*培养基 100mL

小鼠成纤维细胞(EGFP标记) Mouse

LY9 Others Mouse 小鼠 Ly9 / CD229 / SLAMF3 人细胞裂解液 (阳性对照)
粘质沙雷菌PCR检测试剂盒AagininedehydrolaseMedium

纤维素刚果红培养基 250g 用于检测纤维分解微生物

梭菌鉴别琼脂(DCA) Differentia Clostridial Agar 250 用于干燥食品的计数和培养(MERCK方法)

WS琼脂250g/瓶用于沙门氏菌选择性分离incubationmediaWS琼脂250g/瓶用于沙门氏菌选择性分离

ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar柱层层析硅胶(300-400目 37-54um)  进口分装  小鼠垂体瘤细胞

2,3-二溴丙酰胺(98%)  进口分装  大鼠上腺嗜鉻细胞瘤细胞（低分化）

果胶(半乳糖醛酸(干基计)≥74.0 %)  进口分装  小鼠间质细胞瘤细胞

活性炭粉(AR,200目,粉末状,褐色)  进口分装  人膀胱癌耐药株BTC Others Human 人 BTC / Betacellulin 人细胞裂解液 (阳性对照)

肠平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

人B淋巴细胞瘤细胞;RAMOS

293E细胞，稳定表达EBNA1的人胚肾细胞 中国仓鼠卵巢细胞,CTLA4 Ig-24细胞 CL-0286M1(小鼠白血病细胞)5×106cells/瓶×2

A2(人腺样囊性癌细胞) 5×106cells/瓶×2

HPrSMC-c 人类前列腺平滑肌细胞(HPrSMC) 500,000cells 原代神经胶质细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。