当前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR试剂盒>>PCR检测试剂盒>> 50T须毛癣菌PCR检测试剂盒
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。
产品名称:须毛癣菌PCR检测试剂盒
英文名称:Trichophyton mentagrophytesPCR
编号:XG-P2216
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
UVM培养基250g用于李氏菌的增菌培养(MERCK方法)
Bolton肉汤 Boltom Broth 用于空肠弯曲菌的增菌(GB2008标准)
麦康克琼脂3号 Maconkey Agar No.3 250克 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法)
Mueller-Hinton琼脂250g/瓶用于细菌药敏试验incubationmediaMueller-Hinton琼脂250g/瓶用于细菌药敏试验
EnterobacteriaEnrichmentBroth人β乳球蛋白(β-Lg)ELISAKit 进口分装 7--6-巯基嘌呤 7-Methyl-6-Mercaptopurine : 3324-79-6 质量规格: 美国进口
山羊丙检测(e)ELISAKit 进口分装 孟鲁司特 Montelukast Methyl Ketone : 937275-23-5 质量规格: 美国进口
大鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISAKit 进口分装 盐酸决奈达隆-d6 Dronedarone-d6 HCl : 1132693-87-8 质量规格: 美国进口
大鼠型乙酰受体(N-AChR)ELISAKit 进口分装 甘草酸铵B2M Others Rat 大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 人细胞裂解液 (阳性对照)
3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞
大鼠海马神经元细胞*培养基 100mL
MDCK(NBL-2)狗肾细胞 MDCK (NBL-2) dog kidney cells MEM(GIBCO)+10%FBS
IFNG Protein Mouse 重组小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (Fc 标签)
NCI-H1688(人典型小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 3T6-Swiss albino(胚胎成纤维细胞)
须毛癣菌PCR检测试剂盒凸形假单胞杆菌
肺炎克雷伯菌ATCC700603冻干粉
费氏志贺氏菌
苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种
榆干侧耳、大榆磨
德氏乳杆菌乳酸亚种(莱氏曼氏乳杆菌)MONENSIN,wo7iumSALT莫能菌素,钠盐超纯级1G22373-78-0Frozen
wo7iumcromoglycate1KUUSP级,88.5%
草醋钛钾;二醋钛钾 PotcssiuM titcnyl oxclctq;PotcssiuM oxodioxclctodicquotitcnctq(Ⅳ);Titcnyl potcssiuM oxclctq 1440-67-6
硬酯酸甲酯/硬脂酸甲酯/十八酸甲酯/Methyl stearate CP,98% 250克 国产/进口
肝素//肝磷脂/肝磷脂钠盐/Heparin sodium BR,150u/mg 1、5、25、100克、10ml 国产/进口EPHB1 Others Human 人 EphB1 / EPHT2 (aa 565-984) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9
SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓 小鼠精母细胞,GC-2spd细胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮细胞)
人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7
CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人细胞裂解液 (阳性对照)
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