溃蚀齿密螺旋体PCR检测试剂盒 返回列表页

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线

本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分：

技术原理：

       DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

WILKINS-CHALGREN琼脂250g用于厌氧菌的分离培养

MEI培养基 MEI Medium 用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌

支原体培养基基础 Mycoplasma Broth Base 250 用于培养支原体的基础培养基

葡萄糖蛋白胨肉汤250g/瓶用于霉菌、酵母菌检测(日本药典)incubationmedia葡萄糖蛋白胨肉汤250g/瓶用于霉菌、酵母菌检测(日本药典)

大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌检验培养基TTC  进口分装  硫标准溶液(1000ug/ml，基体:1%HCl)  Sulfur standard solution  ：  7704-34-9  质量规格：  1000ug/ml，基体:1%HCl

含1%棉籽糖的PY培养基1ml*20支用于产气荚膜梭菌生化试验  进口分装  苯甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))  Methyl benzoate  ：  93-58-3  质量规格：  standard for GC,≥99.5%(GC)

牛奶培养基  进口分装  1,1,2,2-四乙烷标准溶液(0.92mg/ml,基体：)  1，1，2，2-tetrachloroethane solution  ：  79-34-5  质量规格：  0.92mg/ml,基体：

一次性卫生用品检验检验培养基  进口分装  δ-六六六标准溶液(100μg/ml,u=3%)  δ-HCH solution  ：  319-86-8  质量规格：  100μg/ml,u=3%ADAM15 Others Human 人 ADAM15 CHO细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病细胞)5×106cells/瓶×2

人肺泡上皮细胞裂解物HPAEpiCL

鼬肺上皮细胞;MV-1-Lu 胰腺癌细胞，PANC-1细胞 3T3 clone A31细胞，小鼠胚胎成纤维细胞

人正常前列腺基质永生化细胞;WPMY-1

IFNAR1 Others Mouse 小鼠 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照)
溃蚀齿密螺旋体PCR检测试剂盒大肠埃希菌冻干粉

大肠杆菌 Escherichia coli

平盖灵芝（树舌）

雪白根霉

丝球毛霉

巧克力微杆菌DL-3-基正丁酸，英文名或英文缩写：3-Aminobutanoic acid，级别：BR，98%，规格：100克

1979-3-8丙酰录;录化丙酰Propionyl chloride;Propanoyl chloride;

HEPESFREEACIDHEPES FREE ACID高纯级白色精细粉末RTsigma

油酸钠 Sodium oleate,≥99% 143-19-1 250MG 通用试剂

溴代烷 Cyclopentane Bromide,≥98% 137-43-9 100G 通用试剂CTSB Others Mouse 小鼠 Cathepsin-B / CTSB 人细胞裂解液 (阳性对照)

人膀胱基质成纤维细胞cDNAHBdSF cDNA

3T3? 成纤维细胞

CL-0255A875(人黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2

RLFs, 大鼠肺成纤维细胞

人胚肾细胞(亚系克隆);FIP293 人肾管状上皮细胞*培养基 100mL

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。