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本试剂盒不但准确、快速、灵敏,还具有以下特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单。
2. 预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | |
英文名称 | Trichophyton rubrumPCR |
货号 | XG-P2217 |
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存
2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶和种子。
使用及效果:将压碎的一小重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD。混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:此时DN段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
若溶液体积大于纯化柱容积(800 μl),可分两次离心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
注:溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,以获得高质量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm 离心 3min,以*去除纯化柱中的液体。
注:此步骤的作用是去除残留乙醇,避免残留乙醇影响后续酶促反应。同时也利于DN段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm 离心1min,管底即为目的DN段。贮存于-20℃。
注:溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的段的多少、用户对目的段浓度要求而定。
对溶液Eluent 60℃预热,会提高提取DNA目的段的产量。
UVMSupplement1
布氏琼脂 Brucella Agar 用于弯曲杆菌分离(SN标准)
三糖铁培养基 Triple Sugar Iron Agar 250克 肠杆菌科细菌的生化试验
AK琼脂2号250g/瓶用于检测牛奶和乳制品中抗生素残留时孢子液制备incubationmediaAK琼脂2号250g/瓶用于检测牛奶和乳制品中抗生素残留时孢子液制备
阪崎肠杆菌成套生化鉴定管 11种*2套/盒*5盒 用于阪崎杆菌的生化试验大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISAKit 进口分装 人参皂苷Rd A0245 52705-93-8 HPLC≥98% 20mg/支
大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISAKit 进口分装 乙酰哈巴苷 A0347 6926-14-3 HPLC≥95% 20mg/支
大鼠B因子(BF)ELISAKit 进口分装 人参皂苷CK A0450 39262-14-1 HPLC≥98% 20mg/支
大鼠雄烯二(ASD)ELISAKit 进口分装 绵马贯众素ABBA;东北贯众素 A0553 12777-70-7 HPLC≥98% 20mg/支OSM Others Mouse 小鼠 Oncostatin M / OSM 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-H076人心房肌细胞*培养基100mL
小鼠角膜内皮细胞*培养基 100mL
NCI-H929-UBC-EGFP(稳定株)人骨髓瘤细胞 NCI-H929-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(热灭活)
IL25 Protein Human 重组人 IL25 蛋白 (Fc 标签)
人星形胶质细胞 (HA) (1×106 ) 小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记) Mouse
红色毛癣菌PCR检测试剂盒木耳
肺炎克雷伯菌CMCC46117冻干粉
短小芽孢杆菌
塔宾曲霉
葡萄芽假丝酵母
阴沟肠杆菌阴沟亚种TMB(3,3',5,5'-TETRAmetxYLBENZIDINE)DIxy7noCHLORIDE3,3',5,5'-四联本胺二盐酸高纯级浅褐色粉末C-DYEsigma
3380-34-5三录生;三录新Triclosan
7-bromo-3-metxyl-Benzo[b]thiopxene 17514-70-4
硬酯酸丁酯 Butyl stearate,99% 123-95-5 25ML 通用试剂
Pyruvicacid乙酰酸50毫克高纯,99%EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑马鱼 EFNB2A / Ephrin B2a 人细胞裂解液 (阳性对照)
雪旺氏细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
正常大鼠肾细胞;NRK
WI-38细胞, 人胚肺细胞 小鼠肺成纤维细胞,L929细胞 CL-00025637(人膀胱癌细胞)5×106cells/瓶×2
SMMC-7721(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HDMEC-c 人皮微血管内皮细胞(HDMEC)来自少年者 500,000cells 肺微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 段作为阳性对照。2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加)
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