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DT40细胞(鸡淋巴瘤细胞)

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更新时间:2020-05-24 11:16:06浏览次数:271次

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DT40细胞(鸡淋巴瘤细胞)
规格:1*10⁶cells/T25培养瓶
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名称 DT40细胞(鸡淋巴瘤细胞)
别称 DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40
种属 鸡
年龄(性别) 1日龄
组织来源 法氏囊,淋巴瘤
生长特性 悬浮细胞
细胞形态 淋巴母细胞样
背景描述 DT40细胞是Hyline SC鸡法氏囊淋巴细胞株经鸟类白血病病毒诱导建株的细胞系。原始淋巴瘤用罗氏相关病毒1(RAV-1)感染出生1天的小鸡得到,法氏囊中生成的肿瘤制成细胞悬液后通过静脉注射输入同基因型的受体小鸡。经过一次体内移植后,建立了DT40细胞。DT40细胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,表达的c-myc RNA水平较高。DT40细胞缺少一个正常c-myc基因,但含有两个拷贝ALV去调控的myc基因。DT40细胞保留了重排免疫球蛋白轻链基因(IgL)的能力。在IgL位点,DT40包含一个重排和一个胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40细胞中都能诱导组织相容性(MHC)Ⅱ类抗原表达。v-rel诱导的MHCⅡ表达比c-rel诱导快,且其有效性在数周后达到c-rel的50倍。DT40细胞呈淋巴母细胞表型;传染性检测表明,DT40细胞释放低水平的传染性RAV-1,DT40细胞株可以用于稳转研究。
DT40细胞(鸡淋巴瘤细胞)生物安全等级 1
生长培养基 DMEM(PM150210)+0.05mM β-mercaptoethanol(PB180633)+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~48 hours
冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃
保藏机构 ATCC; CRL-2111 DSMZ; ACC-636

细流式检测细胞凋亡的数据分析方法:

1) 选中所有颗粒,将FSC和SSC设置成对数坐标轴模式备用;

2) 将横轴和纵轴分别设成Annexin通道和PI通道(7-AAD与此类似),选取双阴细胞群;

3) 在双阴细胞门中,将横轴和纵轴分别设成FCS和SSC,将数据呈现方式改为轮廓图,找到细胞碎片,划出碎片门,应用于所有细胞;

4) 在所有细胞中,反选碎片门,得到所有细胞;

5) 将横轴和纵轴分别设成Annexin通道和PI通道,参照未经药物处理的对照组,划出十字门,确定不同群细胞的比例。

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