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RIPA裂解液(强)WB配套产品

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更新时间:2023-04-18 08:52:24浏览次数:279次

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RIPA裂解液(强)WB配套产品
裂解细胞提取总蛋白质,主要用于Western,免疫沉淀。—20℃,12个月

RIPA裂解液(强)WB配套产品

1.裂解细胞提取总蛋白质,主要用于Western,免疫沉淀。
2.主要由NP-40、脱氧胆酸钠、磷酸钠、SDS、EDTA、蛋白酶抑制剂等。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
3.—20℃,12个月

使用方法:

  对于组织样品:

  1.组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

  2.加入10倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)使用高速组织研磨仪*匀浆。

  3.将匀浆液转移至1.5mL离心管中,振荡。冰浴30 min,期间用移液器反复吹打,确保细胞*裂解。

  4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白溶液。

  对于培养细胞样品:

  1.对于贴壁细胞:

  (1)用PBS冲洗细胞2-3次。后一次*吸干残留液。

  (2)加入适当体积的本试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-5 min。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。

  (3)用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5mL离心管中。

  2.对于悬浮细胞:离心收集细胞,每6孔板细胞加约250 μL本试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。

  3.冰浴30 min,期间每10 min用200 μL移液器反复吹打数次,确保细胞*裂解。

  4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白。

RIPA裂解液(强)WB配套产品


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