细胞核转录因子X盒结合蛋白抗体相关信息

抗体 （antibody, Ab） 
1、抗体的概念： 
*机体受到抗原刺激后，由浆细胞合成并分泌出一类具有与抗原发生特异性结合的球蛋白，被称为抗体。 
-抗体主要存在于血清内； 
-抗体都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不一定都是抗体。 
-免疫球蛋白根据重链的结构及抗原特异性不同分为五种，既IgG、 IgD、IgE、 IgA、IgM。 

2、免疫组化实验中常用的抗体：单克隆抗体和多克隆抗体。 
*单克隆抗体：是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，是应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备的。 
-特异性强、抗体产量高。 
*多克隆抗体：是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。 
-特异性低，会产生抗体的交叉反应。 
-多克隆抗体广泛应用于石蜡包埋组织切片，可减少假阴性染色机会。 
-抗原与抗体的结合，要求量保持一定比例，当抗原或抗体过量时，是不能聚合成大颗粒。 
3、抗体的制备——多克隆抗体的制备 
*动物的选择 
*佐剂（adjuvant） 
*免疫方法 
*免疫剂量 
*抗体效价的测定 
*放血或定期抽血 
（1） 动物的选择  细胞核转录因子X盒结合蛋白抗体相关信息 
选择什么动物来免疫取决于： 
*所需抗血清的量 
-小鼠只能提供1.0～1.5ml的血液，而山羊能提供几升。 
*能供免疫用的抗原量 
g足够，而山羊需要几毫克。m-小鼠50 
（1） 动物的选择（续） 
*动物的品系：免疫动物与提供抗原的动物之间的种系差异越大越好。 
-例如哺乳动物的抗原可选择非哺乳动物来制备抗体。 
-常用的动物有兔、羊、马、猪等，以兔（新西兰兔，年轻，健壮，体重在2.5kg左右，雄性）为zui常用。 
（2） 佐剂 （adjuvant） 
*一般可溶性抗原注射后，迅速从注射部位扩散、吸收代谢。佐剂可延长潴留时间，且延长免疫刺激作用。因此在制备抗体的过程中，常将抗原和佐剂一起注射。 
*zui常用的佐剂是弗氏佐剂，又分为: 
-弗氏不*佐剂（Freund's incomplete adjuvant） 
-弗氏*佐剂（Freund's complete adjuvant） 
弗氏不*佐剂