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白血病相关新基因抗体相关信息

时间:2013-2-26阅读:337
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白血病相关新基因抗体相关信息

佐剂 (adjuvant) 
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一般可溶性抗原注射后,迅速从注射部位扩散、吸收代谢。佐剂可延长潴留时间,且延长免疫刺激作用。因此在制备抗体的过程中,常将抗原和佐剂一起注射。 
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zui常用的佐剂是弗氏佐剂,又分为: 
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弗氏不*佐剂(Freund's incomplete adjuvant) 
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弗氏*佐剂(Freund's complete adjuvant) 
弗氏不*佐剂 
(Freund's incomplete adjuvant, FIA) 
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是由油剂石蜡油或植物油与乳化剂羊毛脂或Tween80)混合而成,比例为1:12:13:15:1,可根据需要而定,通常2:1 
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使用时与水溶性抗原按1:1比例充分混合,使抗原分散在佐剂中形成油包水乳剂。 
弗氏*佐剂 (Freund's complete adjuvant, FCA) 
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在弗氏不*佐剂中加入活卡介苗或死的结核分枝杆菌终浓度为220mg/ml),即成为FCA 
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免疫动物时,将弗氏佐剂与抗原按体积 1:1 混合乳化后油包水注入动物。 
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一般注射时用*佐剂乳化,第二次或第三次注射时用不*佐剂或不用佐剂。 
佐剂与抗原乳化的方法 
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研磨法:适于制备大量的佐剂抗原 
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先将不*佐剂加热,取1.73ml放人无菌玻璃研钵内;缓缓滴入0.23ml活卡介苗,边滴边按同一方向研磨,使菌体*分散。 
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按同样方法滴人抗原,每加一滴应研磨至小滴消失。滴加抗原的速度要慢,待抗原全部加人后,应成为乳白色粘稠的油包水乳剂。 
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缺点:研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大,对微量或难得抗原不宜采用。 
佐剂与抗原乳化的方法 
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注射器混合法  白血病相关新基因抗体相关信息 
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将等量的*佐剂和抗原分别吸人两个5ml注射器内,然后插入三通管内,交替推动针管混匀,往复操作直至形成粘稠的乳剂为止。 
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优点:无菌操作,节省抗原或佐剂。 
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缺点:不易乳化,时间长。 
佐剂与抗原乳化的方法 
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快速乳化法:利用超声波粉碎器可快速乳化抗原和佐剂混合物。 
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将抗原和佐剂按所需量加入一离心管中,置于超声波粉碎器上,粉碎头浸入液面下 0.5cm,离瓶底0.5cm左右,以免打碎离心管 
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每次乳化 1015s,然后置冰箱lmin左右。反复乳化34次即可*乳化。管内残余量800r/min离心510min收集。 
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优点:简单、快速、节省材料。 
乳化剂的鉴定 
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判断乳化是否充分,可将一滴乳化好的液体滴在水面上冷水中,如能长时间保持圆珠形而不散开,表示乳化达到要求。 

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