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辣椒素受体抗体相关信息

时间:2013-2-26阅读:500
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辣椒素受体抗体相关信息

抗原修复——原因 
*
常规的石蜡切片标本均用甲醛固定,结果使得: 
-
抗原性物质形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇; 
-
蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。 
*
要求:在染色时,需要*行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。 
抗原修复——方法 
*
化学方法 
*
加热方法 
-
水浴加热法 
-
微波照射法 
-
高压加热法 
-
酸水解法 
(1)
化学方法 
*
主要是通过一些酶的作用,使抗原决定簇暴露。常用的酶有:*、*等。 
C
1040min,主要用于细胞内抗原的显示;°-*:一般使用浓度为0.05%~0.1%,消化时间为37 
C
30180min,主要用于细胞间质抗原的显示。°-*:一般使用浓度为0.1%0.4%,消化时间为37 
*
例如:LamininCollagenIV 
(2)
水浴加热法 
*
将玻片放入装有抗原修复液的容器中,加热至沸腾,持续1015分钟。 
-
优点:操作简单、经济,适用于所有的实验室, 
-
缺点:对封闭牢固的抗原决定簇暴露不理想。 

(3) 微波照射法 
*
将玻片放入装有抗原修复液的容器中,置微波炉加热至95以上,持续l015分钟,冷却后,按免疫组化染色步骤进行。 
*
此方法由于微波场内极性分子、离子高速运动,撞击交联的网链,使抗原异常的构想恢复正常,且因分子运动产热、效率高、时间短,对抗原再现效果好。 
(4)
高压加热法暴露抗原 
*
将玻片浸入抗原修复液内,置高压锅中高压23min,可取得*的效果。 
*
由于高压下受热均匀,特别使用于大批量标本的染色。

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